La córnea es crítica para la visión normal, ya que permite la transmisión de luz a la retina. El epitelio corneal se renueva mediante células epiteliales limbares (CEL), que se encuentran en la periferia de la córnea, el limbo. El daño o la enfermedad que involucra a las CEL puede llevar a diversas presentaciones clínicas de deficiencia de células madre limbares (DCM). Tanto el dolor severo como la ceguera pueden resultar. El trasplante de láminas de células epiteliales mucosas orales autólogas cultivadas (LCEOMAC) representa el primer uso de un tipo de célula autóloga no limbar cultivada para tratar esta enfermedad. Entre los tipos de células no limbares, LCEOMAC y las células epiteliales conjuntivales son las únicas fuentes de células cultivadas en laboratorio que se han explorado en humanos. Hasta ahora, la expresión de p63 es el único predictor del resultado clínico tras el trasplante para corregir la DCM. El método de cultivo óptimo y el sustrato para LCEOMAC no están establecidos. La presente revisión se centra en los métodos de cultivo celular, con especial énfasis en los sustratos. La mayoría de los protocolos de cultivo para LCEOMAC utilizaron membrana amniótica como sustrato e incluyeron los componentes xenogénicos suero fetal bovino y fibroblastos murinos 3T3. Sin embargo, se ha demostrado que los injertos de láminas de células epiteliales bioingenierizadas se pueden fabricar con éxito utilizando superficies de cultivo sensibles a la temperatura y suero autólogo. En los estudios que utilizaron diferentes sustratos para el cultivo de LCEOMAC, la expresión cuantitativa de p63 se informó generalmente de manera deficiente; por lo tanto, se justifica más investigación con cuantificación de datos fenotípicos. Se requiere más investigación para desarrollar un sistema de cultivo para LCEOMAC que imite el entorno natural de las células epiteliales orales/limbares/corneales sin la necesidad de materiales extraños indefinidos como suero y células alimentadoras.