Cribado de Genes de Referencia de qPCR en Quinua Bajo Estrés Gradiente de Frío, Calor y Sequía
Autores: Lu, Qiuwei; Wang, Xueying; Dong, Suxuan; Fu, Jinghan; Lin, Yiqing; Zhang, Ying; Zhao, Bo; Guo, Fuye
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Cribado de Genes de Referencia de qPCR en Quinua Bajo Estrés Gradiente de Frío, Calor y Sequía
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Quinoa
Respuestas al estrés
Genes de referencia
Normalización de qPCR
Estrés de gradiente
Estrés abiótico
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 11
Citaciones: Sin citaciones
La quinoa, un pseudocereal tolerante al estrés ideal para estudiar las respuestas al estrés abiótico, se utilizó para identificar sistemáticamente los genes de referencia óptimos para la normalización de qPCR bajo estrés en gradiente: bajas temperaturas (grupo LT: -2 grados C a -10 grados C), calor (grupo HT: 39 grados C a 45 grados C) y sequía (grupo DR: 7 a 13 días). A través de la evaluación de múltiples algoritmos (GeNorm, NormFinder, BestKeeper, el método Ct y RefFinder) de once candidatos, se establecieron genes óptimos específicos para cada condición como (Actina), (proteína asociada a la fosfatasa IT4), (proteína de la familia Ssu72-like) y (subunidad beta 2 de la triptófano sintasa) para el grupo LT; y (proteína rica en asparagina) para el grupo HT; y (quinasa de fase S) para el grupo DR, con (proteína que contiene dominio LIM), (enzima conjugadora de ubiquitina E2) demostrando estabilidad cruzada al estrés (grupo global). (dihidrodipicolinato sintasa) y (factor de elongación de la traducción) mostraron estabilidad mínima. La validación utilizando marcadores sensibles al estrés - (LT), (HT), (LT) y (DR) - confirmó la fiabilidad; y exhibió patrones de respuesta al frío oscilatorios, alcanzando un pico a 43 grados C antes de declinar, y mostró una regulación ascendente progresiva inducida por sequía. Crucialmente, la normalización con genes inestables distorsionó los perfiles de expresión. Este trabajo proporciona estándares de referencia validados para la transcriptómica de la quinoa bajo estrés abiótico.
Descripción
La quinoa, un pseudocereal tolerante al estrés ideal para estudiar las respuestas al estrés abiótico, se utilizó para identificar sistemáticamente los genes de referencia óptimos para la normalización de qPCR bajo estrés en gradiente: bajas temperaturas (grupo LT: -2 grados C a -10 grados C), calor (grupo HT: 39 grados C a 45 grados C) y sequía (grupo DR: 7 a 13 días). A través de la evaluación de múltiples algoritmos (GeNorm, NormFinder, BestKeeper, el método Ct y RefFinder) de once candidatos, se establecieron genes óptimos específicos para cada condición como (Actina), (proteína asociada a la fosfatasa IT4), (proteína de la familia Ssu72-like) y (subunidad beta 2 de la triptófano sintasa) para el grupo LT; y (proteína rica en asparagina) para el grupo HT; y (quinasa de fase S) para el grupo DR, con (proteína que contiene dominio LIM), (enzima conjugadora de ubiquitina E2) demostrando estabilidad cruzada al estrés (grupo global). (dihidrodipicolinato sintasa) y (factor de elongación de la traducción) mostraron estabilidad mínima. La validación utilizando marcadores sensibles al estrés - (LT), (HT), (LT) y (DR) - confirmó la fiabilidad; y exhibió patrones de respuesta al frío oscilatorios, alcanzando un pico a 43 grados C antes de declinar, y mostró una regulación ascendente progresiva inducida por sequía. Crucialmente, la normalización con genes inestables distorsionó los perfiles de expresión. Este trabajo proporciona estándares de referencia validados para la transcriptómica de la quinoa bajo estrés abiótico.