Los peces cebra a menudo son eutanizados por sobredosis de anestesia. Sin embargo, los peces pueden tener aversión hacia algunos anestésicos, y la eficacia del protocolo varía entre especies. Usando adultos de tipo salvaje, evaluamos el tiempo hasta la pérdida del latido opercular, la capacidad de enderezarse y los reflejos de sobresalto durante la inducción de sobredosis anestésica con tricaína (0.5 g/L o 1 g/L), benzocaína (1 g/L), 2-fenoxietanol (3 mL/L), aceite de clavo (0.1%), isoeugenol (540 mg/L), clorhidrato de lidocaína (1 g/L) o etomidato (50 mg/L). La evaluación inicial demostró que la benzocaína y el clorhidrato de lidocaína tamponado lograron la pérdida más rápida de reflejos. Los tiempos de inducción rápida se confirmaron al volver a probar con lotes más grandes de peces. La inducción más rápida se obtuvo con 1 g/L de clorhidrato de lidocaína tamponado con 2 g/L de NaHCO, en el que todos los peces cebra adultos perdieron reflejos en menos de 2 minutos. A continuación, monitoreamos signos de angustia durante la inducción de sobredosis de benzocaína o clorhidrato de lidocaína tamponado. Los resultados indicaron que el clorhidrato de lidocaína tamponado causó significativamente menos comportamientos aversivos que la benzocaína. Finalmente, probamos varios tampones para refinar la inmersión de clorhidrato de lidocaína. El tampón más eficiente para la inducción de eutanasia usando 1 g/L de clorhidrato de lidocaína fue 2 g/L de NaHCO con 50 mL/L de etanol al 96%, induciendo inmovilidad en menos de 10 segundos y con solo el 2% de los peces cebra adultos mostrando comportamientos aversivos durante el tratamiento.