CRFB5a, un subtipo del receptor de tipo I de IFN de anguila japonesa, regula las funciones antivirales y antimicrobianas del huésped a través de la activación de IRF3/IRF7 y LEAP2
Autores: Wang, Tianyu; Lin, Peng; Wang, Yilei; Lai, Xiaojian; Chen, Pengyun; Li, Fuyan; Feng, Jianjun
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
CRFB5a, un subtipo del receptor de tipo I de IFN de anguila japonesa, regula las funciones antivirales y antimicrobianas del huésped a través de la activación de IRF3/IRF7 y LEAP2
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Ifnar1
Crfb5a
Hígado
Intestino
Genes relacionados con el sistema inmunológico
Péptidos antimicrobianos
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 6
Citaciones: Sin citaciones
IFNAR1, uno de los receptores de IFN tipo I, es crucial para la defensa del hospedador mamífero contra la invasión viral. Sin embargo, se conoce poco sobre el papel inmunológico de la proteína IFNAR1 de los teleósteos, también conocida como CRFB5. Hemos clonado con éxito el cDNA completo del homólogo CRFB5a de la anguila japonesa. Los dos dominios de fibronectina-3 y la región transmembrana (238-260 aa) de CRFB5a están presentes normalmente, y comparte una estructura tridimensional con el pez cebra, el arowana asiático y los humanos. Según los análisis de expresión, CRFB5a se expresa en alta cantidad en todos los tejidos encontrados, particularmente en el hígado y el intestino. In vivo, LPS y el mimético viral poli I:C aumentaron drásticamente la expresión de CRFB5a en el hígado. Se informó que las células hepáticas de la anguila japonesa expresaban CRFB5a más fuertemente in vitro después de ser expuestas o estimuladas con poli I:C. Las membranas de las células hepáticas de la anguila japonesa contenían proteínas EGFP-CRFB5a, algunas de las cuales estaban condensadas, según los resultados de la microscopía de fluorescencia. Los ensayos de reportero de luciferasa mostraron que la sobreexpresión de CRFB5a aumentó fuertemente la expresión de genes relacionados con la inmunidad en las células hepáticas de la anguila japonesa, como IFN1, IFN2, IFN3, IFN4, IRF3, IRF5 e IRF7 de la vía de señalización de IFN tipo I, así como uno de los péptidos antimicrobianos esenciales LEAP2, además de inducir significativamente las actividades del promotor de IFN humano en células HEK293. Además, los datos de interferencia de ARN (RNAi) demostraron que la reducción de CRFB5a causó que los ocho genes disminuyeran drásticamente su expresión en las células hepáticas de la anguila japonesa, así como en grados variables en el riñón, el bazo, el hígado y el intestino. Nuestros hallazgos mostraron que CRFB5a participa en la respuesta inmune del hospedador a la infección bacteriana al inducir péptidos antimicrobianos mediado por LEAP2 y modula favorablemente las respuestas inmunitarias antivirales del hospedador al activar las vías de señalización de IFN tipo I impulsadas por IRF3 e IRF7.
Descripción
IFNAR1, uno de los receptores de IFN tipo I, es crucial para la defensa del hospedador mamífero contra la invasión viral. Sin embargo, se conoce poco sobre el papel inmunológico de la proteína IFNAR1 de los teleósteos, también conocida como CRFB5. Hemos clonado con éxito el cDNA completo del homólogo CRFB5a de la anguila japonesa. Los dos dominios de fibronectina-3 y la región transmembrana (238-260 aa) de CRFB5a están presentes normalmente, y comparte una estructura tridimensional con el pez cebra, el arowana asiático y los humanos. Según los análisis de expresión, CRFB5a se expresa en alta cantidad en todos los tejidos encontrados, particularmente en el hígado y el intestino. In vivo, LPS y el mimético viral poli I:C aumentaron drásticamente la expresión de CRFB5a en el hígado. Se informó que las células hepáticas de la anguila japonesa expresaban CRFB5a más fuertemente in vitro después de ser expuestas o estimuladas con poli I:C. Las membranas de las células hepáticas de la anguila japonesa contenían proteínas EGFP-CRFB5a, algunas de las cuales estaban condensadas, según los resultados de la microscopía de fluorescencia. Los ensayos de reportero de luciferasa mostraron que la sobreexpresión de CRFB5a aumentó fuertemente la expresión de genes relacionados con la inmunidad en las células hepáticas de la anguila japonesa, como IFN1, IFN2, IFN3, IFN4, IRF3, IRF5 e IRF7 de la vía de señalización de IFN tipo I, así como uno de los péptidos antimicrobianos esenciales LEAP2, además de inducir significativamente las actividades del promotor de IFN humano en células HEK293. Además, los datos de interferencia de ARN (RNAi) demostraron que la reducción de CRFB5a causó que los ocho genes disminuyeran drásticamente su expresión en las células hepáticas de la anguila japonesa, así como en grados variables en el riñón, el bazo, el hígado y el intestino. Nuestros hallazgos mostraron que CRFB5a participa en la respuesta inmune del hospedador a la infección bacteriana al inducir péptidos antimicrobianos mediado por LEAP2 y modula favorablemente las respuestas inmunitarias antivirales del hospedador al activar las vías de señalización de IFN tipo I impulsadas por IRF3 e IRF7.