Tras las disminuciones de la población del elefante de sabana africano en todo el continente africano, el establecimiento de líneas celulares primarias de especies de vida silvestre en peligro de extinción es fundamental para la preservación de sus recursos genéticos. Además, permite estudios moleculares y funcionales sobre los mecanismos de supresión del cáncer en los elefantes, que anteriormente se han relacionado con una redundancia de los genes supresores de tumores. Esta metodología describe el establecimiento de líneas celulares de fibroblastos dérmicos de elefante (EDF) a partir de muestras de biopsia de piel (diámetro: +/-4 mm) de elefantes de sabana africana (n = 4, 14-35 años). La técnica de recolección de tejido aplicada es mínimamente invasiva y allana el camino para futuras biopsias remotas con dardos. En promedio, el primer crecimiento de explante se observó después de 15.75 +/- 6.30 días. El tiempo de duplicación promedio (Td) fue de 93.02 +/- 16.94 h y 52.39 +/- 0.46 h en el paso 1 y 4, respectivamente. Los extendidos de metafase confirmaron el número diploide de 56 cromosomas. El establecimiento exitoso de líneas celulares EDF permite futuros estudios de caracterización celular de elefantes y la investigación sobre los mecanismos de resistencia al cáncer de los elefantes, que pueden ser aprovechados para la prevención y tratamiento del cáncer en humanos y contribuyen a la conservación de su material genético.