Caracterización y Construcción de un Clon Infeccioso de cDNA de Longitud Completa de un Nuevo Aislado de BCMV en el Grupos de Patógenos III
Autores: Zhang, Jinglei; Dong, Li; Zhou, Jue; Huo, Sifan; Feng, Haixu; Jing, Chenchen; Feng, Xue
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Caracterización y Construcción de un Clon Infeccioso de cDNA de Longitud Completa de un Nuevo Aislado de BCMV en el Grupos de Patógenos III
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Virus
Virus del mosaico del frijol común
DY9
Inestabilidad genética
Clon infeccioso
Patotipo.
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 8
Citaciones: Sin citaciones
(BCMV) es uno de los virus principales que impacta severamente el rendimiento y la calidad de los frijoles comunes (L.) y tiene una distribución mundial. Utilizando secuenciación de ARN pequeño y validación por RT-PCR, este estudio identificó una co-infección generalizada por múltiples virus en muestras de frijoles comunes recolectadas en el campo, siendo BCMV la especie viral dominante. Se obtuvo un nuevo aislado, designado DY9, de estas muestras de campo. La caracterización del patotipo confirmó que DY9 es del patotipo PG-III, mientras que estudios previos reportaron que todos los demás miembros de PG-III son (BCMNV). La secuenciación del genoma completo y el análisis filogenético revelaron que DY9 estaba genéticamente más cerca de BCMV y se desvió significativamente de los aislados conocidos de PG-III. Basado en estos hallazgos, construimos un clon infeccioso de DY9. Para abordar la inestabilidad genética en el sistema de expresión, descubrimos que insertar el Intron 2 (derivado del gen de , GenBank: U10419.1) en la posición 2431 del gen HC-Pro y dirigir el Intron 1 (derivado del gen de , GenBank: X04753.1) en la posición 4240 del gen CI mejoró significativamente la estabilidad del vector de clonación. Se verificó que el clon infectaba sistemáticamente plantas de frijol común e inducía síntomas típicos de mosaico. La infectividad fue validada a través de RT-PCR, RT-qPCR, Western blotting y microscopía electrónica de transmisión. Este estudio representa la primera construcción exitosa de un clon infeccioso para el patotipo PG-III BCMV, proporcionando una herramienta crítica de genética inversa para desentrañar la patogénesis viral e identificar genes de resistencia. Estos hallazgos no solo expanden la diversidad genética de BCMV, sino que también ofrecen una referencia metodológica para construir clones infecciosos de especies.
Descripción
(BCMV) es uno de los virus principales que impacta severamente el rendimiento y la calidad de los frijoles comunes (L.) y tiene una distribución mundial. Utilizando secuenciación de ARN pequeño y validación por RT-PCR, este estudio identificó una co-infección generalizada por múltiples virus en muestras de frijoles comunes recolectadas en el campo, siendo BCMV la especie viral dominante. Se obtuvo un nuevo aislado, designado DY9, de estas muestras de campo. La caracterización del patotipo confirmó que DY9 es del patotipo PG-III, mientras que estudios previos reportaron que todos los demás miembros de PG-III son (BCMNV). La secuenciación del genoma completo y el análisis filogenético revelaron que DY9 estaba genéticamente más cerca de BCMV y se desvió significativamente de los aislados conocidos de PG-III. Basado en estos hallazgos, construimos un clon infeccioso de DY9. Para abordar la inestabilidad genética en el sistema de expresión, descubrimos que insertar el Intron 2 (derivado del gen de , GenBank: U10419.1) en la posición 2431 del gen HC-Pro y dirigir el Intron 1 (derivado del gen de , GenBank: X04753.1) en la posición 4240 del gen CI mejoró significativamente la estabilidad del vector de clonación. Se verificó que el clon infectaba sistemáticamente plantas de frijol común e inducía síntomas típicos de mosaico. La infectividad fue validada a través de RT-PCR, RT-qPCR, Western blotting y microscopía electrónica de transmisión. Este estudio representa la primera construcción exitosa de un clon infeccioso para el patotipo PG-III BCMV, proporcionando una herramienta crítica de genética inversa para desentrañar la patogénesis viral e identificar genes de resistencia. Estos hallazgos no solo expanden la diversidad genética de BCMV, sino que también ofrecen una referencia metodológica para construir clones infecciosos de especies.