Los efectos adversos para la salud tanto del humo de tabaco activo como del pasivo han sido bien conocidos en los humanos durante mucho tiempo. Es presumible que incluso las mascotas, que comparten íntimamente el estilo de vida del propietario, puedan estar expuestas a los mismos riesgos. Este estudio tuvo como objetivo detectar y cuantificar la cotinina (un metabolito de la nicotina) en el suero y el pelo de los perros utilizando un kit de inmunoensayo ELISA comercial específico. Se inscribieron un total de 32 perros, 16 expuestos y 16 no expuestos al humo del propietario. La concentración de cotinina fue mayor en el grupo expuesto que en el no expuesto en ambas matrices (< 0.001), con valores más altos en suero que en pelo (< 0.001). Las perras expuestas tenían mayor cotinina en el pelo que los perros machos (< 0.001). Por el contrario, las concentraciones de cotinina en suero y pelo eran más bajas en las hembras que en los machos del grupo no expuesto (< 0.01). La intensidad de la exposición, la edad y el peso de los perros no afectaron las concentraciones de cotinina. Se estimó un valor de corte de 2.78 ng/mL y 1.13 ng/mL de concentración de cotinina en suero y pelo, respectivamente, para distinguir entre los perros expuestos y no expuestos. Se confirmó que la cotinina es un marcador valioso del tabaquismo pasivo también en perros. Aunque los propietarios no perciben el humo de segunda mano como un riesgo para sus perros, se debería aconsejar una mayor concienciación, especialmente en animales gestantes.