La criopreservación de semen se refiere al método de almacenamiento a largo plazo de esperma a través de tecnología de ultra-bajo temperatura, con el objetivo de mantener la actividad biológica y la capacidad de fertilización del esperma para su uso posterior. La criopreservación de semen de pollo es crucial para utilizar genética de alta calidad, pero los resultados son limitados. Este estudio exploró los resultados de la criopreservación de semen desde la perspectiva de los indicadores séricos y la modificación epigenética del ADN espermático. A través de la detección sérica, pruebas de calidad del semen, WGBS (secuenciación de bisulfito de genoma completo) y BSP (PCR de secuenciación de bisulfito), se estableció una correlación significativa entre los niveles de testosterona sérica y la calidad de la criopreservación del semen, y se secuenciaron y verificaron genes clave relacionados con la motilidad del esperma criopreservado. Estos hallazgos proporcionan información para mejorar la preservación del semen y tienen aplicaciones potenciales en la cría de aves de corral y tecnologías de criopreservación.