El pez cebra es un modelo valioso para la investigación en neurociencia, pero las condiciones de alojamiento a las que se expone diariamente pueden estar afectando su estado de bienestar. El uso de enriquecimiento ambiental y la mejora de la metodología para la medición de cortisol podrían reducir el estrés, mejorando su bienestar y su idoneidad como modelo animal utilizado en la investigación sobre el estrés. Así, este estudio tuvo como objetivo evaluar (I) la influencia de diferentes condiciones de alojamiento en la fisiología y el comportamiento del pez cebra, y (II) el potencial del moco cutáneo para la medición de cortisol en peces cebra adultos. Para ello, los peces cebra AB fueron criados en condiciones ambientales desérticas o enriquecidas (tubos de PVC y grava). Después de 6 meses, se evaluó su comportamiento mediante diferentes paradigmas conductuales (agrupamiento, prueba de caja blanca-negra y tanque novedoso). La respuesta fisiológica también se evaluó a través de los niveles de cortisol (homogenatos de cuerpo entero y moco cutáneo) y marcadores de estrés oxidativo en el cerebro. Los resultados revelaron que los peces alojados en condiciones enriquecidas tenían una mayor distancia entre vecinos más cercanos y una actividad reducida. Sin embargo, no se observó efecto en la longitud corporal ni en los biomarcadores de estrés; los niveles de cortisol en el cuerpo entero y en el moco cutáneo presentaron el mismo perfil entre los grupos. En conclusión, este estudio destaca el potencial del moco cutáneo como matriz para la cuantificación de cortisol y cómo las condiciones de alojamiento podrían influir en los datos en futuros estudios.