En la recuperación viral in vitro, los rendimientos bajo diferentes tampones de re-suspensión en la floculación de hierro para concentrar el virus de la septicemia hemorrágica viral genotipo IVa en agua de mar
Autores: Ryu, Na-Gyeong; Baek, Eun-Jin; Kim, Min-Jae; Kim, Kwang-Il
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
En la recuperación viral in vitro, los rendimientos bajo diferentes tampones de re-suspensión en la floculación de hierro para concentrar el virus de la septicemia hemorrágica viral genotipo IVa en agua de mar
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Hierro
Virus
Concentración
Elución
Tampones
Infectividad
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 7
Citaciones: Sin citaciones
La floculación con hierro se utiliza ampliamente para concentrar virus en agua, seguida de la formación de flóculos de Fe-virus, su recolección y elución. En la etapa de elución, un tampón de resuspensión de ácido oxálico o ascórbico disolvió el hidróxido de hierro. Después de la concentración del virus de la septicemia hemorrágica viral (VHSV) en agua de mar (1 x 10 a 1 x 10 copias del genoma viral o unidades formadoras de placa (PFU)/mL), se investigó el rendimiento de recuperación del genoma viral utilizando PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) y la infectividad viral utilizando el ensayo de placa para evaluar la validez de los dos tampones de resuspensión para concentrar VHSV. El rendimiento medio de recuperación del genoma viral con ácido oxálico y ácido ascórbico fue del 71.2 +/- 12.3% y 81.4 +/- 9.5%, respectivamente. Los rendimientos medios de recuperación infectiva viral basados en PFU fueron significativamente diferentes entre los dos tampones, siendo del 23.8 +/- 22.7% (ácido oxálico) y 4.4 +/- 2.7% (ácido ascórbico). Notablemente, aunque el ácido oxálico mantiene la infectividad viral por encima del 60% a una concentración viral superior a 10 PFU/mL, los VHSV infectivos no se recuperaron suficientemente a una baja concentración viral (10 PFU/mL).
Descripción
La floculación con hierro se utiliza ampliamente para concentrar virus en agua, seguida de la formación de flóculos de Fe-virus, su recolección y elución. En la etapa de elución, un tampón de resuspensión de ácido oxálico o ascórbico disolvió el hidróxido de hierro. Después de la concentración del virus de la septicemia hemorrágica viral (VHSV) en agua de mar (1 x 10 a 1 x 10 copias del genoma viral o unidades formadoras de placa (PFU)/mL), se investigó el rendimiento de recuperación del genoma viral utilizando PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) y la infectividad viral utilizando el ensayo de placa para evaluar la validez de los dos tampones de resuspensión para concentrar VHSV. El rendimiento medio de recuperación del genoma viral con ácido oxálico y ácido ascórbico fue del 71.2 +/- 12.3% y 81.4 +/- 9.5%, respectivamente. Los rendimientos medios de recuperación infectiva viral basados en PFU fueron significativamente diferentes entre los dos tampones, siendo del 23.8 +/- 22.7% (ácido oxálico) y 4.4 +/- 2.7% (ácido ascórbico). Notablemente, aunque el ácido oxálico mantiene la infectividad viral por encima del 60% a una concentración viral superior a 10 PFU/mL, los VHSV infectivos no se recuperaron suficientemente a una baja concentración viral (10 PFU/mL).