Los ácidos grasos no esterificados (AGNE) son fundamentales en el metabolismo energético, sin embargo, altas concentraciones pueden llevar a la cetosis, un trastorno metabólico común en el ganado. Nuestro laboratorio observó niveles más bajos de L-histidina en ganado que sufría de cetosis, lo que indica una posible interacción entre la L-histidina y el metabolismo de los AGNE. Esta relación nos llevó a investigar las alteraciones metabolómicas en las células epiteliales mamarias bovinas (BMEC) inducidas por niveles elevados de AGNE y a explorar los posibles efectos mitigadores de la L-histidina. Nuestro análisis metabolómico no dirigido reveló 893 y 160 cambios en metabolitos en modelos positivos y negativos, respectivamente, con puntajes VIP superiores a 1 y valores p por debajo de 0.05. Metabolitos notables como el ácido 9,10-epoxi-12-octadecenoico fueron regulados al alza, mientras que la 9-Etilguanina fue regulada a la baja. Un análisis de vías sugirió interrupciones en las vías de biosíntesis de ácidos grasos y esteroides. Además, el tratamiento con L-histidina alteró 61 metabolitos en el modelo positivo y 34 en el modelo negativo, con implicaciones para vías similares afectadas por los AGNE. Superponer metabolitos diferenciales de ambas condiciones reveló un posible mediador clave, la 1-Linoleoylglicerofosfocolina, que fue regulada en direcciones opuestas por los AGNE y la L-histidina. Nuestro estudio descubrió que tanto los análisis metabolómicos de AGNE como de L-histidina señalan vías similares de biosíntesis de lípidos, con la 1-Linoleoylglicerofosfocolina emergiendo como un posible metabolito clave que media su interacción, un descubrimiento que puede ofrecer perspectivas para estrategias terapéuticas en enfermedades metabólicas.