Congelación Lenta de Espermatozoides de Jabalíes Conservados: Comparación de Técnicas Convencionales y Automatizadas sobre la Calidad Funcional Post-Thaw mediante una Nueva Combinación de Pruebas de Función Espermática
Autores: Pezo, Felipe; Zambrano, Fabiola; Uribe, Pamela; de Andrade, André Furugen Cesar; Sánchez, Raúl
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Congelación Lenta de Espermatozoides de Jabalíes Conservados: Comparación de Técnicas Convencionales y Automatizadas sobre la Calidad Funcional Post-Thaw mediante una Nueva Combinación de Pruebas de Función Espermática
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Congelación lenta
Material genético
Nitrógeno líquido
Equipo de congelación automatizado
Funcionalidad post-descongelación
Motilidad
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
La congelación lenta del esperma de jabalí es la única forma de preservar material genético durante períodos prolongados; esto se puede lograr con la exposición a vapores de nitrógeno líquido (convencional) o utilizando equipos de congelación automatizados. El objetivo era comparar el efecto de ambas técnicas en la funcionalidad post-descongelación. El esperma de jabalí, desprovisto de plasma seminal y resuspendido en un medio de lactosa-yema de huevo-glicerol, fue criopreservado. Convencional: las pajillas fueron expuestas a vapores de LN; automatizado: utilizando una curva de caída de -39.82 gradosC·min durante 113 s de -5 a -80 gradosC durante el período crítico; y posterior inmersión en NL. Se evaluaron la viabilidad celular, el flujo de colesterol, el potencial de membrana mitocondrial (MMP), la peroxidación lipídica, el peroxinitrito, los niveles de anión superóxido, la translocación de fosfatidilserina y la activación de caspasas mediante citometría de flujo. Además, se determinaron la motilidad total (TM) y la motilidad progresiva (PM) mediante el sistema SCA inmediatamente (T0), 60 (T60) y 120 min (T120) post-descongelación. La congelación automatizada reduce significativamente el flujo de colesterol y los niveles de radicales libres y peroxidación lipídica, lo que permite preservar la motilidad durante 120 min de incubación. Al mismo tiempo, la viabilidad, la integridad del acrosoma, el MMP y la activación de caspasas no difirieron de la técnica convencional. En conclusión, controlar la curva de descenso de temperatura utilizando equipos de congelación automatizados reduce el estrés oxidativo/nitrosativo, preservando la fluidez de la membrana y la motilidad del esperma.
Descripción
La congelación lenta del esperma de jabalí es la única forma de preservar material genético durante períodos prolongados; esto se puede lograr con la exposición a vapores de nitrógeno líquido (convencional) o utilizando equipos de congelación automatizados. El objetivo era comparar el efecto de ambas técnicas en la funcionalidad post-descongelación. El esperma de jabalí, desprovisto de plasma seminal y resuspendido en un medio de lactosa-yema de huevo-glicerol, fue criopreservado. Convencional: las pajillas fueron expuestas a vapores de LN; automatizado: utilizando una curva de caída de -39.82 gradosC·min durante 113 s de -5 a -80 gradosC durante el período crítico; y posterior inmersión en NL. Se evaluaron la viabilidad celular, el flujo de colesterol, el potencial de membrana mitocondrial (MMP), la peroxidación lipídica, el peroxinitrito, los niveles de anión superóxido, la translocación de fosfatidilserina y la activación de caspasas mediante citometría de flujo. Además, se determinaron la motilidad total (TM) y la motilidad progresiva (PM) mediante el sistema SCA inmediatamente (T0), 60 (T60) y 120 min (T120) post-descongelación. La congelación automatizada reduce significativamente el flujo de colesterol y los niveles de radicales libres y peroxidación lipídica, lo que permite preservar la motilidad durante 120 min de incubación. Al mismo tiempo, la viabilidad, la integridad del acrosoma, el MMP y la activación de caspasas no difirieron de la técnica convencional. En conclusión, controlar la curva de descenso de temperatura utilizando equipos de congelación automatizados reduce el estrés oxidativo/nitrosativo, preservando la fluidez de la membrana y la motilidad del esperma.