Las células estromales mesenquimales (MSC) han adquirido una relevancia especial en aplicaciones regenerativas del tejido óseo. MSCs han sido aisladas de diferentes depósitos, siendo el tejido adiposo reconocido como una de las fuentes más convenientes, dada su amplia disponibilidad, alto rendimiento celular y obtención. Recientemente, el ligamento falciforme (FL) ha sido considerado como un posible depósito para el aislamiento de células estromales derivadas del tejido adiposo (FL-ADSCs). Sin embargo, la capacidad osteogénica de FL-ADSCs no ha sido caracterizada previamente. Por lo tanto, el presente estudio tuvo como objetivo la caracterización detallada de la funcionalidad de FL-ADSCs tras la inducción osteogénica a través de una estrategia clásica (basada en dexametasona-DEX) o una estrategia innovadora con ácido retinoico (RA) en un enfoque comparativo con ADSCs de una región visceral de control. Las culturas fueron caracterizadas por la proliferación celular, actividad metabólica, morfología celular, organización citoesquelética y mitocondrial fluorescente, y análisis de expresión génica de actividad osteogénica y tinción citoquímica. Las poblaciones derivadas de FL expresaron niveles significativamente más altos de genes osteogénicos y marcadores citoquímicos, especialmente con la inducción de DEX, en comparación con los ADSCs de control que fueron más receptivos a RA. Se identificó a FL-ADSCs como una fuente potencial para aplicaciones regenerativas óseas, dada la funcionalidad osteogénica elevada. Además, los datos resaltaron la importancia de la selección del programa inductor osteogénico más adecuado en relación con las especificidades de la población celular basal.