miRNA juega un papel importante en el crecimiento y desarrollo de las plantas y en respuesta a diversas tensiones. La tecnología de PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) se utiliza a menudo para detectar el nivel de expresión de miARN y genes comparándolos con genes de referencia. Con el fin de seleccionar los miARN de referencia óptimos en diferentes variedades de peonía arbórea, se utilizaron los pétalos de 42 variedades de peonía arbórea de floración temprana y tardía como materiales experimentales, y se utilizaron los programas geNorm, NormFinder, Bestkeeper y RefFinder para evaluar la estabilidad de 16 miARN de referencia candidatos. Los resultados mostraron que los valores promedio de Ct de todos los miARN de referencia candidatos estaban entre 15.34 +/- 0.29 y 32.64 +/- 0.38. El número óptimo de miARN de referencia fue cuatro, que fueron , , , y en geNorm. La estabilidad de fue la más alta en los resultados del análisis del software NormFinder. Entre los resultados del análisis del software Bestkeeper, tiene la mayor estabilidad. Entre los resultados de la evaluación y análisis integral de varios programas utilizando RefFinder, el miARN de referencia candidato con la mayor estabilidad fue . Cuando se utilizó como el miARN de referencia, la expresión de y en respuesta a diferentes tiempos de floración de la peonía arbórea fue relativamente estable en 42 variedades de peonía arbórea, lo que indica que fue estable y confiable. Los resultados de este estudio proporcionan un miARN de referencia para estudiar los cambios de expresión de miARN en diferentes variedades de peonía arbórea y explorar más a fondo el mecanismo regulador de miARN en diferentes variedades de peonía.