Las variedades locales de trigo durum (L. ssp.), que representan una etapa intermedia en la domesticación, están ganando atención debido a su alta variabilidad genética y rendimiento en entornos desafiantes. Si bien se han examinado los principales metabolitos del grano, se ha realizado una investigación limitada sobre componentes bioactivos menores como los lípidos, a pesar de sus beneficios nutricionales. Para abordar esto, analizamos veintidós accesiones tetraploides, que comprenden cultivares élite modernos y variedades locales, para (i) verificar si el proceso de selección de rasgos relacionados con el rendimiento llevado a cabo durante la Revolución Verde ha influido en la cantidad y composición de lípidos; (ii) descubrir la extensión de la variabilidad composicional de lípidos, proporcionando evidencia de que la huella lipídica identifica efectivamente firmas evolutivas; y (iii) identificar genotipos interesantes para programas de mejoramiento que busquen mejorar el rendimiento y la nutrición. Curiosamente, la grasa total no se correlacionó con el peso del grano, lo que indica que la composición de lípidos es un rasgo prometedor para la selección. Los tri- y di-acilgliceroles fueron los principales componentes lipídicos junto con los ácidos grasos libres, y su contenido relativo varió significativamente entre los genotipos. En particular, las variedades locales pertenecientes a diferentes ecotipos difirieron significativamente en los perfiles de lípidos totales y ácidos grasos. Nuestros hallazgos proporcionan evidencia de que las variedades locales pueden ser una fuente genéticamente relevante de variabilidad lipídica, con potencial para ser explotadas para mejorar la calidad nutricional del trigo.