Hay controversia sobre la utilidad del antígeno prostático específico (PSA) como biomarcador del cáncer de próstata (PCa). Esta controversia surge cuando hay diferencias en los resultados de las modalidades de ensayo de PSA. En este estudio, que tuvo como objetivo evaluar una validación adecuada entre las dos modalidades de ensayo de PSA, se analizó el acuerdo entre los resultados de las dos modalidades. Se realizaron exámenes de PSA utilizando dos modalidades de ensayo de PSA en 4810 pacientes. Se utilizó el coeficiente de correlación intraclase (ICC) y el análisis de kappa ponderado para evaluar el acuerdo entre las dos modalidades de ensayo. Se realizó una regresión lineal para evaluar la asociación entre las dos modalidades de ensayo. Según los valores de ICC (ICC: 0.999, < 0.001) y los valores del análisis de kappa ponderado (kappa: 0.951, error estándar de alfa (ASE): 0.001, < 0.0001), el acuerdo entre las modalidades de ensayo fue calificado como excelente. Sin embargo, la fuerza del acuerdo fue pobre en los siguientes subgrupos de PSA: 0.05-0.1 ng/mL (ICC: 0.281, = 0.0860); 0.15-0.2 ng/mL (ICC: 0.288, = 0.0036); 1.5-2.0 ng/mL (ICC: 0.360, = 0.0860); y 2.0-2.5 ng/mL (ICC: 0.303, = 0.0868). En el análisis de regresión lineal, cuando la modalidad B de PSA arrojó un valor de 0.2 ng/mL, el valor esperado para la modalidad A fue de 0.258 ng/mL (IC del 95%: 0.255-0.260), y cuando la modalidad B de PSA arrojó un valor de 4 ng/mL, el valor esperado para la modalidad A fue de 3.192 ng/mL (IC del 95%: 3.150-3.235). Se confirma la diferencia en los valores de PSA entre las dos modalidades de ensayo de PSA, y esta diferencia puede ser clínicamente significativa.