subsp. es una hierba aromática con un sabor a menta-orégano, utilizada en las regiones mediterráneas en la medicina tradicional. Las partes aéreas de la planta son ricas en aceite esencial que tiene propiedades antioxidantes, antimicrobianas y antiinflamatorias, así como actividad insecticida. El objetivo de nuestro trabajo fue determinar el rendimiento y la composición del aceite esencial de la planta, en relación con la temporada de cosecha y el método de cultivo, es decir, al aire libre, invernadero y cultivo in vitro, utilizando cromatografía de gases-espectrometría de masas (CG-EM) como herramienta analítica. El rendimiento de aceite esencial fluctuó de manera similar en plantas al aire libre e invernadero durante el año (0.9-2.6%), con porcentajes más altos (2.1-2.6%) en los períodos más cálidos de junio a octubre (etapa de floración) y abril (etapa vegetativa), y fue similar al rendimiento en plantas in vitro (1.7%). Se identificaron más compuestos en el aceite de plantas al aire libre e invernadero (35) en comparación con el de plantas in vitro (21), mientras que los compuestos principales fueron los mismos, es decir, pulegona (13.0-32.0%, más alto en febrero-abril, 15.0% in vitro), óxido de piperitenona (3.8-31.8%, más bajo en febrero, 34.2% in vitro), epóxido de piperitona (4.6-16.4%, más alto en febrero, 15.5% in vitro), D-limoneno (2.1-8.8%, más bajo en febrero, 10.0% in vitro), isomentona (2.3-23.0%, más alto en febrero, 4.6% in vitro), germacreno D (1.9-6.5% más alto en diciembre-abril, 2.9% in vitro) y dicyclogermacreno (2.1-5.3%, más alto en diciembre-abril, 5.2% in vitro). Por lo tanto, los cultivos en invernadero e in vitro fueron igualmente eficientes en la producción de aceite esencial y sus constituyentes como el cultivo al aire libre, mientras que en los cultivos al aire libre e invernadero, la temporada de cosecha, principalmente debido a las temperaturas ambientales predominantes, afectó el rendimiento del aceite esencial y su composición porcentual.