La creciente evidencia ha demostrado que los extractos de diferentes especies de holoturias ejercen efectos beneficiosos sobre la salud humana. Los cánceres de mama triple negativo (TNBC) son tumores altamente malignos que presentan un mal pronóstico debido a la falta de terapias dirigidas efectivas. En el intento de identificar compuestos novedosos que puedan contrarrestar el crecimiento de células TNBC, estudiamos el efecto de la exposición de la línea celular TNBC MDA-MB231 a extractos acuosos totales y filtrados del fluido coelómico obtenido del pepino de mar, una especie ampliamente distribuida en el mar Mediterráneo. En particular, examinamos la viabilidad celular y el comportamiento proliferativo, la distribución del ciclo celular, la apoptosis, la autofagia y el estado metabólico/redox celular mitocondrial. Los resultados obtenidos indican que tanto los extractos totales como los fraccionados son potentes inhibidores de la viabilidad y el crecimiento de células TNBC, actuando tanto a través de un deterioro de la progresión del ciclo celular y del potencial transmembrana mitocondrial como de una estimulación de la autofagia celular, como lo demuestra el aumento de los orgánulos vesiculares ácidos y de los marcadores proteicos intracelulares beclin-1, y LC3 total y LC3-II tras la exposición temprana a las preparaciones. La identificación del componente(s) bioactivo(s) soluble(s) en agua presente en el extracto merece una investigación adicional con el objetivo de desarrollar agentes de prevención y/o tratamiento novedosos eficaces contra carcinomas mamarios altamente metastásicos.