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Ensayo de Citometría de Tejidos con Segmentación Nuclear para Cuantificar Células NETóticas en Neutrófilos Estimulados por Espermatozoides en Especies Veterinarias

Autores: Rivera-Concha, Rodrigo; León, Marion; Ponce-Rojas, Nikol; Prado-Sanhueza, Aurora; Uribe, Pamela; Taubert, Anja; Hermosilla, Carlos; Sánchez, Raúl; Zambrano, Fabiola

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2025

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Acceso abierto

Artículo científico
2025

Ensayo de Citometría de Tejidos con Segmentación Nuclear para Cuantificar Células NETóticas en Neutrófilos Estimulados por Espermatozoides en Especies Veterinarias


Categoría

Ciencias Agrícolas y Biológicas

Subcategoría

Zootecnia

Palabras clave

Neutrófilos
Activación
Expansión del núcleo
Mamíferos
Perros
Vacas

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 7

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
Cuando se activan, los neutrófilos hacen tres cosas: fagocitan, liberan sustancias químicas que combaten infecciones y liberan trampas que atrapan y matan patógenos. Determinar la expansión del área nuclear de los neutrófilos activados es fundamental para demostrar la activación temprana de los neutrófilos y se ha convertido en un estándar. Aquí, mostramos un método automatizado para medir cuánto se expande el núcleo de los neutrófilos en dos mamíferos diferentes: perros y vacas. Para ambas especies, los neutrófilos se separaron de la sangre y se incubaron con esperma fresco. Para las muestras de perro, los neutrófilos y el esperma se incubaron durante 120 minutos, y para las muestras de vaca, los neutrófilos y el esperma se incubaron durante 240 minutos. Se tomaron imágenes de fluorescencia utilizando un microscopio de fluorescencia y luego se analizaron. Las imágenes muestran la liberación de trampas extracelulares de neutrófilos cuando son activados por espermatozoides en ambas especies. Esto se demuestra porque la elastasa de neutrófilos y la tinción de ADN están en el mismo lugar. Los núcleos de las células se expandieron a tan solo 15 minutos y se detectaron hasta 120 minutos en ambas especies. El análisis mostró que los conjuntos de datos de ambas especies eran fiables y consistentes con otros métodos que se habían publicado. Este método fue creado para medir automáticamente la expansión de los núcleos de neutrófilos en diferentes especies.

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