Los Órganos-en-un-Chip representan plataformas novedosas para modelar la fisiología y enfermedades humanas. El ganglio linfático (LN) es un órgano inmune relevante en el que los linfocitos B y T están organizados espacialmente en una arquitectura compleja, y es el lugar donde inicia la respuesta inmune. El presente estudio aborda la utilidad de un LN-en-un-chip recientemente diseñado para diseccionar y comprender el efecto de medicamentos entregados a células en un entorno tridimensional multicelular fluido que imita al LN humano. Para ello, analizamos la movilidad y viabilidad de linfocitos B y T humanos expuestos a hidroxicloroquina (HCQ). Mostramos que la innovadora plataforma de LN, que opera a nivel microscópico, permite el monitoreo en tiempo real de linfocitos B y T en co-cultivo mediante imágenes, y apoya el movimiento celular aleatorio. La HCQ entregada a las células a través de un flujo constante e continuo induce una reducción en la velocidad de los linfocitos T mientras promueve un movimiento rotacional persistente. También encontramos que la HCQ aumenta la producción de especies reactivas de oxígeno en los linfocitos T. En conjunto, estos resultados resaltan el potencial del LN-en-un-chip para ser aplicado en el cribado y desarrollo de medicamentos, y en estudios de dinámica celular.