El cáncer es la principal causa de muerte tanto en humanos como en animales de compañía. El tumor mamario canino es una enfermedad importante con una alta incidencia y tasa de metástasis, y su mal pronóstico sigue siendo un serio desafío clínico. El ceramida C6 es un metabolito de esfingolípido de cadena corta con un poderoso potencial como supresor tumoral. Sin embargo, el impacto específico de la ceramida C6 en el cáncer mamario canino sigue sin estar claro. Por lo tanto, investigamos el papel de la ceramida C6 en el progreso del cáncer mamario canino y exploramos su posible mecanismo. La ceramida C6 inhibió el crecimiento celular al regular el ciclo celular sin involucrar la apoptosis. Además, la ceramida C6 inhibió la migración y la invasión de las células CHMp. En vivo, la ceramida C6 disminuyó el crecimiento tumoral y la metástasis en los pulmones sin efectos secundarios. Una investigación adicional encontró que la reducción de la expresión de EGR3 llevó a un aumento notable en la proliferación y migración al regular al alza las expresiones de pJAK1 y pSTAT3, activando así la vía de señalización JAK1/STAT3. En conclusión, la ceramida C6 inhibe el crecimiento y la metástasis del cáncer mamario canino al dirigirse a EGR3 a través de la regulación de la vía de señalización JAK1/STAT3. Este estudio implica los mecanismos subyacentes a la actividad anti-tumoral de la ceramida C6 y demuestra el potencial de EGR3 como un nuevo objetivo para el tratamiento del cáncer mamario canino.