Las líneas celulares gonadales poseen las habilidades de autorrenovación y diferenciación, siendo utilizadas como una herramienta eficiente para analizar las funciones de los genes involucrados en la diferenciación sexual y la gametogénesis. Aunque se han logrado algunos avances significativos en la cultura o manipulación de células gonadales a través de múltiples filos, incluidos los teleósteos y los mamíferos, hay un estudio limitado sobre la manipulación de células gonadales en tortugas. En este estudio, establecimos una nueva línea celular ovárica de la joven tortuga amarilla asiática, que exhibió un cariotipo diploide normal con alta actividad de fosfatasa alcalina. La línea celular, designada como YTO2, fue caracterizada a través del análisis de perfiles de expresión génica. El análisis del transcriptoma y la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR) mostraron que las células expresaban genes de línea germinal como . Además, la inmunotinción mostró que los marcadores de células germinales, las proteínas Tdrd7 y Rad51, se detectaron predominantemente en el citoplasma de la región perinuclear, mientras que el marcador de proliferación, PCNA, se observó predominantemente en los núcleos de las células cultivadas. Curiosamente, las células pudieron responder a la inducción de ácido retinoico aumentando significativamente el nivel de expresión de algunos genes de meiosis, incluidos . Además, las células YTO2 pudieron ser transfectadas eficientemente con el adenovirus pHBAd-BHG-EGFP y expresaron adecuadamente los genes exógenos. En resumen, se había establecido una línea celular ovárica de la tortuga amarilla asiática que podría ser propagada de manera estable bajo condiciones de cultivo in vitro, así como ser capaz de expresar eficientemente el gen exógeno. Esta línea celular proporcionaría una herramienta valiosa para elaborar los mecanismos moleculares detrás del desarrollo, diferenciación y oogénesis de las células germinales en la tortuga, incluso en reptiles.