Las células madre mesenquimatosas (CMM) poseen un potencial de diferenciación significativo, lo que las convierte en una opción muy prometedora en medicina e inmunoterapia debido a sus capacidades regenerativas y la secreción de exosomas. Sin embargo, desafíos como las divisiones celulares limitadas y las pruebas complejas obstaculizan la producción a gran escala de CMM. En este estudio, establecimos con éxito una línea de CMM inmortalizada al transfectar el gen de la telomerasa humana (TERT) en CMM aisladas de cordones umbilicales de ovejas embarazadas. Este enfoque inhibe eficazmente la senescencia celular y promueve la proliferación celular, lo que permite la generación de células madre mesenquimatosas de cordón umbilical (CMMCU) a mayor escala. Nuestros hallazgos demuestran que estas CMMCU transfectadas con TERT exhiben una capacidad proliferativa mejorada y una tasa de envejecimiento reducida en comparación con las CMMCU regulares, manteniendo su potencial de pluripotencia sin preocupaciones de tumorigenicidad. En consecuencia, tienen un gran potencial para aplicaciones médicas que requieren grandes cantidades de CMM funcionales.