Caracterización y Modelado por Homología de la Proteína Recombinante PhaC Catalíticamente Activa de
Autores: Duangsri, Chanchanok; Salminen, Tiina A.; Alix, Marion; Kaewmongkol, Sarawan; Akrimajirachoote, Nattaphong; Khetkorn, Wanthanee; Jittapalapong, Sathaporn; Mäenpää, Pirkko; Incharoensakdi, Aran; Raksajit, Wuttinun
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Caracterización y Modelado por Homología de la Proteína Recombinante PhaC Catalíticamente Activa de
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Polihidroxibutirato
Enzimas
Biosíntesis
PhaC
Recombinante
Modelo estructural
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 18
Citaciones: Sin citaciones
El polihidroxibutirato (PHB) es un polímero biocompatible y biodegradable que tiene el potencial de reemplazar a los polímeros derivados de fósiles. Las enzimas involucradas en la biosíntesis de PHB son beta-ceto-tiolasas (PhaA), reductasa de acetoacetil-CoA (PhaB) y sintasa de PHA (PhaC). PhaC es la enzima clave para la producción de PHB. En este estudio, se construyeron las células recombinantes 10G que albergan (rPhaC). El rPhaC sobreexpresado y purificado, con una masa molecular predicha de 69 kDa, exhibió valores de 24.5 +/- 2 mol/min/mg, 31.3 +/- 2 uM y 412.7 +/- 2 1/s, respectivamente. El rPhaC catalíticamente activo era un homodímero. El modelo estructural tridimensional para el homodímero asimétrico de PhaC se construyó basado en PhaC de la especie USM2. El modelo obtenido de PhaC reveló que la conformación general de un monómero estaba en la conformación cerrada, catalíticamente inactiva, mientras que el otro monómero estaba en la conformación abierta, catalíticamente activa. En la conformación activa, los residuos de la tríada catalítica (Cys151-Asp310-His339) estaban involucrados en la unión del sustrato 3HB-CoA y el dominio CAP de PhaC estaba involucrado en la dimerización.
Descripción
El polihidroxibutirato (PHB) es un polímero biocompatible y biodegradable que tiene el potencial de reemplazar a los polímeros derivados de fósiles. Las enzimas involucradas en la biosíntesis de PHB son beta-ceto-tiolasas (PhaA), reductasa de acetoacetil-CoA (PhaB) y sintasa de PHA (PhaC). PhaC es la enzima clave para la producción de PHB. En este estudio, se construyeron las células recombinantes 10G que albergan (rPhaC). El rPhaC sobreexpresado y purificado, con una masa molecular predicha de 69 kDa, exhibió valores de 24.5 +/- 2 mol/min/mg, 31.3 +/- 2 uM y 412.7 +/- 2 1/s, respectivamente. El rPhaC catalíticamente activo era un homodímero. El modelo estructural tridimensional para el homodímero asimétrico de PhaC se construyó basado en PhaC de la especie USM2. El modelo obtenido de PhaC reveló que la conformación general de un monómero estaba en la conformación cerrada, catalíticamente inactiva, mientras que el otro monómero estaba en la conformación abierta, catalíticamente activa. En la conformación activa, los residuos de la tríada catalítica (Cys151-Asp310-His339) estaban involucrados en la unión del sustrato 3HB-CoA y el dominio CAP de PhaC estaba involucrado en la dimerización.