La heterogeneidad de los medicamentos terapéuticos de anticuerpos monoclonales (mAb) se debe a las variantes de proteínas generadas durante el proceso de fabricación. Estas variantes de proteínas pueden ser atributos críticos de calidad (CQAs) dependiendo de su potencial impacto en la seguridad y/o eficacia del medicamento. Para identificar los CQAs y garantizar las cualidades del producto, se requiere una caracterización exhaustiva pero desafiante debido a la estructura compleja de los biofármacos. Los estudios de caracterización pasados para variantes básicas y ácidas revelaron que las caracterizaciones completas estaban limitadas a las variantes de carga básica, mientras que las mediciones cuantitativas de las variantes ácidas dejaban vacíos. En consecuencia, la caracterización y cuantificación de las variantes ácidas son más desafiantes. Un estudio de caso de un mAb1 terapéutico representaba dos tercios de las variantes ácidas enriquecidas en el estudio de caracterización inicial. Esto llevó a investigaciones adicionales, cerrando las brechas de cuantificación de las variantes ácidas de mAb1. Este trabajo demuestra que un estudio bien diseñado con las elecciones correctas de métodos analíticos puede desempeñar un papel clave en los estudios de caracterización. Por lo tanto, se recomiendan estrategias actualizadas para una caracterización más completa de las variantes de carga de anticuerpos.