Caracterización de Macrófagos Derivados de Monocitos Porcinos Cultivados en Medio Reducido en Suero
Autores: tpánová, Hana; Kavanová, Lenka; Levá, Lenka; Vícenová, Monika; astný, Kamil; Faldyna, Martin
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
2022
Caracterización de Macrófagos Derivados de Monocitos Porcinos Cultivados en Medio Reducido en Suero
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Objetivo del estudio
Sistema de cultivo celular
Macrófagos derivados de monocitos porcinos
Condiciones de cultivo con suero reducido
FBS
Condiciones de cultivo
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 23
Citaciones: Sin citaciones
El objetivo de este estudio fue establecer un sistema de cultivo celular para la generación de macrófagos derivados de monocitos porcinos (MDMs) en condiciones de suero reducido. Se compararon cultivos basados en el suplemento de medio de crecimiento Nu-Serum(tm) (NUS) o un suero fetal bovino convencional (FBS), que incluyó la evaluación de FBS de dos proveedores diferentes (FBS1 y FBS2). Los datos obtenidos confirmaron el impacto significativo de las condiciones de cultivo en los MDMs generados in vitro. Los MDMs cultivados en condiciones de suero reducido mostraron niveles aumentados de ARNm de IL-1beta y CD86 y un perfil de citoquinas proinflamatorias, caracterizado por el aumento de la expresión de ARNm de IL-23p19, CXCL10 y CCL5. Las actividades fagocíticas y de explosión respiratoria no se vieron afectadas negativamente. Sorprendentemente, la diferencia entre los dos FBS fue mucho más pronunciada que el efecto del suplemento de suero reducido. Las condiciones de cultivo de FBS1 dieron lugar a macrófagos con niveles de superficie más altos de CD14, CD16 y CD163, una menor expresión de ARNm de CD80 y una mayor inducción de la expresión del gen IL-10. En contraste, ninguna de estas tendencias se observó en los cultivos de macrófagos suplementados con FBS2. En su lugar, el cultivo de FBS2 mostró niveles aumentados de ARNm de IL-1b y CD86. En conclusión, el cultivo con suero reducido es una herramienta útil para la generación in vitro de MDM porcinos, en línea con la tendencia actual de investigación de reducir el uso de FBS en la investigación biológica.
Descripción
El objetivo de este estudio fue establecer un sistema de cultivo celular para la generación de macrófagos derivados de monocitos porcinos (MDMs) en condiciones de suero reducido. Se compararon cultivos basados en el suplemento de medio de crecimiento Nu-Serum(tm) (NUS) o un suero fetal bovino convencional (FBS), que incluyó la evaluación de FBS de dos proveedores diferentes (FBS1 y FBS2). Los datos obtenidos confirmaron el impacto significativo de las condiciones de cultivo en los MDMs generados in vitro. Los MDMs cultivados en condiciones de suero reducido mostraron niveles aumentados de ARNm de IL-1beta y CD86 y un perfil de citoquinas proinflamatorias, caracterizado por el aumento de la expresión de ARNm de IL-23p19, CXCL10 y CCL5. Las actividades fagocíticas y de explosión respiratoria no se vieron afectadas negativamente. Sorprendentemente, la diferencia entre los dos FBS fue mucho más pronunciada que el efecto del suplemento de suero reducido. Las condiciones de cultivo de FBS1 dieron lugar a macrófagos con niveles de superficie más altos de CD14, CD16 y CD163, una menor expresión de ARNm de CD80 y una mayor inducción de la expresión del gen IL-10. En contraste, ninguna de estas tendencias se observó en los cultivos de macrófagos suplementados con FBS2. En su lugar, el cultivo de FBS2 mostró niveles aumentados de ARNm de IL-1b y CD86. En conclusión, el cultivo con suero reducido es una herramienta útil para la generación in vitro de MDM porcinos, en línea con la tendencia actual de investigación de reducir el uso de FBS en la investigación biológica.