El nematodo entomopatógeno Heterorhabditis sp. SL0708 (Rhabditida: Heterorhabditidae), aislado del suelo en Alcalá, Valle del Cauca (Colombia), se caracterizó ecológicamente utilizando larvas de Galleria mellonella (L) (Pyralidae: Galleriinae) como hospedantes. Se evaluó el efecto de la temperatura sobre la viabilidad, la infectividad y la reproducción, y de la humedad sobre la infectividad y el almacenamiento en líquido en juveniles infectivos (JI). Se encontraron diferencias significativas en la viabilidad, la infectividad y la reproducción de los JI a diferentes temperaturas. No se recuperaron nematodos a 5 °C ni a 10 °C, y a 35 °C no se observó infectividad. La recuperación diaria promedio de nematodos fue óptima a 25 °C, y la supervivencia de los JI fue baja en sustratos con 13 % de humedad. La temperatura óptima de almacenamiento para Heterorhabditis sp. SL0708 se mantuvo entre 20 °C y 30 °C, manteniendo su infectividad hasta por 8 semanas.