La vigilancia de murciélagos hematófagos es una medida importante de salud pública para la prevención y el control de epidemias de rabia en animales herbívoros domésticos. El objetivo de este estudio fue localizar y georreferenciar refugios de D. rotundus en el municipio de São Pedro, SP, Brasil, y verificar su naturaleza (artificial o natural), el paisaje circundante y la distancia a los ríos principales. Para ello, se tomaron dos muestras de poblaciones en refugios, con un intervalo de seis meses entre ellas, capturando todos los murciélagos presentes en refugios con menos de 20 individuos y aproximadamente el 20% de los murciélagos presentes en refugios con más de 20 individuos, para cuantificar su distribución por género y edad. Se verificó que la mayoría de los D. rotundus (67%) eran artificiales y el resto (33%), naturales. De los seis refugios artificiales encontrados, cinco se ubicaron en casas abandonadas y uno en un canal de drenaje de aguas pluviales. No se encontraron indicios de D. rotundus en otras edificaciones rurales ni viaductos ubicados cerca de pastizales. A pesar de que la mayoría de los refugios de D. rotundus eran artificiales, los tres refugios más poblados eran colonias de maternidad: dos estaban ubicados en grutas y solo uno en un refugio artificial (canal de drenaje de agua de lluvia). Los refugios restantes estaban ocupados únicamente por machos. Con la excepción de un refugio, todos los demás se encontraban a menos de 3 km de los principales cuerpos de agua del área de estudio, lo que corrobora estudios que indican que los principales ríos del estado de São Paulo son los principales accidentes geográficos relacionados con la presencia de D. rotundus. También se verificó que el 67 % de los refugios estaban habitados únicamente por machos, lo que confirma otros estudios realizados en el estado de São Paulo, donde más del 60 % de los grupos de Desmodus contienen solo machos.