Caracterización de la adenosina desaminasa (ADA) en la hemolinfa de Biomphalaria glabrata
Autores: Vale, MR; Pereira, RV; Almeida, SM; Almeida, YM; Nunes, SFLC
Idioma: Inglés
Editor: Takako Matsumura-Tundisi
Año: 2005
Acceso abierto
Caracterización de la adenosina desaminasa (ADA) en la hemolinfa de Biomphalaria glabrata
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La adenosina es una molécula de señalización importante para numerosos eventos celulares. La adenosina desaminasa (ADA) es una enzima clave para el control de los niveles extracelulares e intracelulares de adenosina. Se detectó actividad de ADA en la hemolinfa de B. glabrata y se determinaron experimentalmente sus condiciones óptimas de ensayo. La variación de pH de 6,2 a 7,8 no provocó cambios significativos en la actividad de ADA. Utilizando adenosina como sustrato, la Km aparente a pH 6,8 fue de 734 µmoles.L⁻¹. La actividad máxima se observó a 37 °C. Las condiciones estándar de ensayo se establecieron en 15 minutos de incubación, 0,4 µL de hemolinfa pura por ensayo, pH 6,8 y 37 °C. Esta enzima mostró actividades de 834 ± 67 µmol.min-1.L-1 (25ºC) y 2029 ± 74 µmol.min-1.L-1 (37ºC), superando las del suero humano sano en 40 y 100 veces, respectivamente. Una temperatura de incubación más alta causó una disminución de la actividad del 20% a 43ºC o del 70% a 50ºC durante 15 minutos. La ADA perdió del 26 al 78% de su actividad cuando la hemolinfa se preincubó a 50ºC durante 2 o 15 minutos, respectivamente. Dado que la ADA de la hemolinfa presentó niveles altos, se puede concluir que en animales sanos y alimentados, la adenosina se mantiene en bajas concentraciones. Además, la pequeña variación de la actividad en el rango de pH de 6,2 a 7,8 sugiere que la adenosina se mantiene en niveles bajos en la hemolinfa incluso en condiciones adversas, en las que el pH se altera.
La adenosina es una molécula de señalización importante para numerosos eventos celulares. La adenosina desaminasa (ADA) es una enzima clave para el control de los niveles extracelulares e intracelulares de adenosina. Se detectó actividad de ADA en la hemolinfa de B. glabrata y se determinaron experimentalmente sus condiciones óptimas de ensayo. La variación de pH de 6,2 a 7,8 no provocó cambios significativos en la actividad de ADA. Utilizando adenosina como sustrato, la Km aparente a pH 6,8 fue de 734 µmoles.L⁻¹. La actividad máxima se observó a 37 °C. Las condiciones estándar de ensayo se establecieron en 15 minutos de incubación, 0,4 µL de hemolinfa pura por ensayo, pH 6,8 y 37 °C. Esta enzima mostró actividades de 834 ± 67 µmol.min-1.L-1 (25ºC) y 2029 ± 74 µmol.min-1.L-1 (37ºC), superando las del suero humano sano en 40 y 100 veces, respectivamente. Una temperatura de incubación más alta causó una disminución de la actividad del 20% a 43ºC o del 70% a 50ºC durante 15 minutos. La ADA perdió del 26 al 78% de su actividad cuando la hemolinfa se preincubó a 50ºC durante 2 o 15 minutos, respectivamente. Dado que la ADA de la hemolinfa presentó niveles altos, se puede concluir que en animales sanos y alimentados, la adenosina se mantiene en bajas concentraciones. Además, la pequeña variación de la actividad en el rango de pH de 6,2 a 7,8 sugiere que la adenosina se mantiene en niveles bajos en la hemolinfa incluso en condiciones adversas, en las que el pH se altera.