Con la creciente popularidad de los gatos como animales de compañía, la supervivencia de los gatitos recién nacidos a menudo se ve amenazada por factores como la lactancia inadecuada, el comportamiento materno y la incompatibilidad sanguínea. Estos desafíos requieren el uso de sustitutos de la leche para la crianza. Para investigar los efectos de alimentar a los gatitos con un sustituto de leche experimental (EMR) en el crecimiento y desarrollo, la microbiota intestinal, la respuesta inmune y el metabolismo de nutrientes, 12 gatitos British shorthair fueron divididos aleatoriamente en dos grupos después de la lactancia durante la primera semana de vida. Los gatitos fueron alimentados con leche de la reina o EMR, siendo los gatitos alimentados con leche de la reina el grupo de control (CON). Los hallazgos revelaron que el grupo CON exhibió actividad de superóxido dismutasa (SOD) y capacidad antioxidante total (T-AOC) (< 0.01) en el día 7. Sin embargo, el grupo EMR tuvo un mejor rendimiento de crecimiento durante la etapa posterior del experimento (< 0.05); la inmunocompetencia y la capacidad antioxidante del grupo EMR no fueron significativamente diferentes de las del grupo CON en las etapas media y tardía del experimento, y los valores medios de todos los índices fueron ligeramente mejores que los del grupo de control. La secuenciación del gen 16S rRNA en la microbiota demostró que EMR aumentó la colonización de géneros bacterianos, incluyendo , , y . En comparación con el grupo CON, el ácido acético (< 0.05), el ácido propiónico (< 0.01) y los SCFAs totales (< 0.01) en el grupo EMR aumentaron significativamente. Además, la ingesta de EMR resultó en la producción de metabolitos distintos implicados en el metabolismo de lípidos y aminoácidos, entre otros nutrientes, lo que revitalizó las vías metabólicas asociadas. Estos resultados elucidan el impacto de administrar un sustituto de leche en la salud gastrointestinal y la asimilación de nutrientes en los gatitos. El estudio proporciona información sobre el uso de alternativas a la leche en polvo y sienta las bases para futuras investigaciones sobre la formulación y efectividad de los sustitutos de leche para gatitos.