Los microorganismos del suelo son esenciales para mantener la función y la salud de los ecosistemas agrícolas. Sin embargo, las respuestas de las comunidades microbianas a los cambios a largo plazo en el uso de la tierra han sido insuficientemente exploradas. Por lo tanto, basándonos en 15 años de experimentos de campo en la región de Mollisol noreste de China, aplicamos la tecnología de secuenciación de alto rendimiento Illumina para estudiar los efectos de diferentes tipos de uso de la tierra, incluyendo labranza convencional (CT), tierra desnuda (BL), no labranza (NT), restauración de vegetación natural (NVR) y forestación (AF), en las comunidades bacterianas a lo largo del perfil del suelo (0-5 cm, 5-10 cm, 10-20 cm y 20-30 cm) y las redes de co-ocurrencia, e identificamos sus relaciones con las propiedades fisicoquímicas del suelo. Los hallazgos indicaron que el tipo de uso de la tierra, así como la profundidad del suelo, afectaron significativamente la diversidad y la estructura de las comunidades bacterianas. No hubo una diferencia marcada en la diversidad de las comunidades bacterianas entre CT y NT en diferentes profundidades del suelo, excepto a una profundidad de 20-30 cm. En NT, NVR y AF, la abundancia relativa de Actinomycetota y Firmicutes fue mayor que en CT. Por el contrario, CT mostró una abundancia notablemente mayor de Proteobacteria y Acidobacteriota que BL, NT, NVR y AF. En comparación con CT y BL, se identificó una mayor estabilidad y complejidad de las redes de co-ocurrencia de la comunidad para NT, NVR y AF. Además, la diversidad y composición de las comunidades bacterianas se correlacionaron con el nitrógeno total (TN), el pH y el carbono orgánico total (TOC) del suelo. Nuestro estudio reveló el mecanismo potencial por el cual los cambios a largo plazo en el uso de la tierra afectaron la distribución de las comunidades bacterianas del suelo, lo cual es de gran importancia para el desarrollo sostenible de la agricultura y la gestión óptima de los recursos terrestres.