Células embrionarias primarias de garrapatas Rhipicephalus microplus y Amblyomma cajennense como sustrato para el desarrollo de Borrelia burgdorferi (cepa G39/40).
Autores: Rezende, J.; Rangel, C. P.; Cunha, N. C.; Fonseca, A. H.
Idioma: Inglés
Editor: Takako Matsumura-Tundisi
Año: 2012
Acceso abierto
Artículo científico
2012
Células embrionarias primarias de garrapatas Rhipicephalus microplus y Amblyomma cajennense como sustrato para el desarrollo de Borrelia burgdorferi (cepa G39/40).
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Ciencia Animal y Zoología
Palabras clave
Cultivo celular
Borrelia burgdorferi
Garrapata
Rhipicephalus microplus
Amblyomma cajennense
Licencia
CC BY – Atribución
Consultas: 28
Citaciones: Sin citaciones
Borrelia burgdorferi, agente de la borreliosis de Lyme, es una espiroqueta transmitida por garrapatas a humanos y animales. Su cultivo in vitro en células de garrapatas permite el estudio de su biología y proporciona una metodología para futuras investigaciones en Brasil, así como para el aislamiento de Borrelia spp. Examinamos in vitro las características de las células embrionarias de Rhipicephalus microplus y Amblyomma cajennense en cultivo celular e investigamos su idoneidad como sustrato para el cultivo de B. burgdorferi. Se prepararon subcultivos a partir de cultivos primarios de células embrionarias de R. microplus y A. cajennense, mantenidas en medio completo de Leibovitz (L-15) a 28 °C y 31 °C, respectivamente. Una vez formada la monocapa, el medio L-15 se sustituyó por medio Barbour-Stoener-Kelly para realizar experimentos de infección de cultivos celulares con B. burgdorferi. Tras 72 horas de cultivo, se realizó el recuento de espiroquetas mediante un microscopio de contraste de fase invertido e iluminación de campo oscuro (400×). Se observó la supervivencia, multiplicación y adherencia de B. burgdorferi en células embrionarias de R. microplus y A. cajennense. B. burgdorferi cultivada con células embrionarias de R. microplus creció en promedio hasta una densidad (recuento final) de 2,4 × 10⁻¹ espiroquetas/ml, mientras que en cultivo acelular se contabilizó un promedio de 2,5 × 10⁻¹ espiroquetas/ml. En cultivo con células de A. cajennense, el recuento final de espiroquetas fue en promedio de 1,7 × 10⁻¹ espiroquetas/ml, mientras que las espiroquetas cultivadas acelularmente se replicaron en promedio a 2,2 × 10⁻¹ espiroquetas/ml. Se observaron resultados similares en el recuento final de espiroquetas cultivadas en células de R. microplus y A. cajennense, en comparación con el control sin células. Estos resultados demostraron que las células de R. microplus y A. cajennense tienen el potencial de ser utilizadas como sustrato de crecimiento para B. burgdorferi en el estudio de su interacción con las células hospedadoras.
Descripción
Borrelia burgdorferi, agente de la borreliosis de Lyme, es una espiroqueta transmitida por garrapatas a humanos y animales. Su cultivo in vitro en células de garrapatas permite el estudio de su biología y proporciona una metodología para futuras investigaciones en Brasil, así como para el aislamiento de Borrelia spp. Examinamos in vitro las características de las células embrionarias de Rhipicephalus microplus y Amblyomma cajennense en cultivo celular e investigamos su idoneidad como sustrato para el cultivo de B. burgdorferi. Se prepararon subcultivos a partir de cultivos primarios de células embrionarias de R. microplus y A. cajennense, mantenidas en medio completo de Leibovitz (L-15) a 28 °C y 31 °C, respectivamente. Una vez formada la monocapa, el medio L-15 se sustituyó por medio Barbour-Stoener-Kelly para realizar experimentos de infección de cultivos celulares con B. burgdorferi. Tras 72 horas de cultivo, se realizó el recuento de espiroquetas mediante un microscopio de contraste de fase invertido e iluminación de campo oscuro (400×). Se observó la supervivencia, multiplicación y adherencia de B. burgdorferi en células embrionarias de R. microplus y A. cajennense. B. burgdorferi cultivada con células embrionarias de R. microplus creció en promedio hasta una densidad (recuento final) de 2,4 × 10⁻¹ espiroquetas/ml, mientras que en cultivo acelular se contabilizó un promedio de 2,5 × 10⁻¹ espiroquetas/ml. En cultivo con células de A. cajennense, el recuento final de espiroquetas fue en promedio de 1,7 × 10⁻¹ espiroquetas/ml, mientras que las espiroquetas cultivadas acelularmente se replicaron en promedio a 2,2 × 10⁻¹ espiroquetas/ml. Se observaron resultados similares en el recuento final de espiroquetas cultivadas en células de R. microplus y A. cajennense, en comparación con el control sin células. Estos resultados demostraron que las células de R. microplus y A. cajennense tienen el potencial de ser utilizadas como sustrato de crecimiento para B. burgdorferi en el estudio de su interacción con las células hospedadoras.