Las proteínas bZIP (básicas de cremallera de leucina) desempeñan roles cruciales en diversas funciones biológicas. El nitrógeno (N) es un elemento esencial para el crecimiento de las plantas, especialmente en el pepino debido a sus raíces poco profundas. Sin embargo, la regulación de los genes bZIP en el metabolismo del nitrógeno en el pepino aún no se ha estudiado. En este estudio, identificamos un total de 72 genes bZIP (CsbZIPs) en el genoma del pepino que podrían clasificarse en 13 grupos. Estos genes estaban distribuidos de manera desigual en siete cromosomas, y el análisis de sinonimia mostró que los genes CsbZIP se expandieron de manera segmental duplicada. Además, nuestro análisis de expresión a nivel genómico sugirió que los genes CsbZIP tenían diferentes patrones y que cinco genes CsbZIP fueron regulados por el tratamiento con nitrógeno tanto en hojas como en raíces. De acuerdo con CsNPF, CsbZIP55 y CsbZIP65 fueron regulados por el tratamiento con nitrógeno en hojas y raíces. Además, la localización subcelular mostró que CsbZIP55 y CsbZIP65 estaban específicamente ubicados en el núcleo, y el ensayo de activación transcripcional mostró que CsbZIP55 y CsbZIP65 tienen actividad de activación transcripcional. Adicionalmente, en las plantas de sobreexpresión, la mayoría de los genes CsNPF regulados por nitrógeno fueron regulados a la baja. En conjunto, nuestro análisis integral de la familia de genes bZIP sienta las bases para comprender las funciones moleculares y fisiológicas de los CsbZIPs.