El herpesvirus (HV) ha sido conocido por causar enfermedades en búhos, con varios signos clínicos y resultados durante las últimas décadas. Se detectó el gen de HV en hisopos orofaríngeos y cloacales de un búho real en una colección zoológica en Ljubljana, Eslovenia. En los siguientes 4 meses, a pesar de la continua detección de HV en los hisopos, no se observaron signos clínicos con un vínculo claro a la enfermedad por HV. Las terapias hepatoprotectoras e inmunoestimulantes aplicadas durante este período no previnieron la eliminación de HV. Por lo tanto, se realizó una terapia antiviral por vía oral con aciclovir (150 mg/kg cada 24 horas durante siete días), y el búho dio negativo en la siguiente toma de muestras y permaneció negativo durante los siguientes 8 meses. Después de eso, el búho volvió a dar positivo por la presencia de HV, y se realizó el mismo protocolo con la terapia antiviral. Después de 3 semanas con un test negativo para la presencia de HV, sin signos clínicos de enfermedad, el búho murió repentinamente debido a una infección por el virus Usutu (USUV). Entre todos los búhos del zoológico, curiosamente, solo el búho real positivo para HV murió debido a la infección por USUV. La secuencia de USUV detectada y obtenida en este estudio se agrupa con otras secuencias de Europa 2 detectadas en países vecinos. Nuestro estudio muestra el potencial de la terapia con aciclovir en la prevención de la eliminación de herpesvirus y, además, en la reducción de la posibilidad de propagación de HV a otros búhos y aves. Hasta donde sabemos, este es el primer informe de la presencia de HV y la infección por USUV en un búho real en Eslovenia.