Este estudio tuvo como objetivo evaluar la biorremediación de suelos contaminados con fuel oil 6 (FO6) utilizando espectroscopía de reflectancia difusa (DR) en el espectro electromagnético visible y de infrarrojo cercano (Vis-NIR). Para lograr nuestro objetivo, determinamos la firma espectral del fuel oil 6 (FO6), desarrollamos un modelo de calibración para cuantificar los hidrocarburos totales del petróleo y evaluamos la biorremediación en suelos contaminados con FO6 e inoculados con . Se tomaron muestras de suelo superficial (SS) (0-30 cm de profundidad) de suelo Entisol no contaminado de la Central Térmica Termoesmeraldas, Ecuador, y muestras de arena cuartzo (QS) se contaminaron con FO6 a una concentración conocida de 0.5, 1, 3, 6, 9, 12 % en peso en base gravimétrica. Se tomó una muestra de suelo Entisol contaminado para aislar de un sitio de derrame ubicado en Termoesmeraldas. se aumentó con éxito en un medio de melaza. Los resultados sugirieron que la banda de sobretono de combinación de estiramiento C-H alrededor de 2300 nm es la que hace la contribución significativa a la firma espectral de FO6 y para el análisis de suelos Entisols contaminados con FO6. El modelo de calibración para muestras de QS y SS mostró un excelente acuerdo con los datos experimentales R2 = 0.9989 y R2 = 0.9968, respectivamente. Se encontraron los a 0, 7, 14, 21 y 23 días después de la inoculación utilizando un modelo de calibración desarrollado y el índice de hidrocarburos Unach. Mientras que las muestras de QS mostraron la tasa de recuperación más baja (13.6%), los SS de Entisols mostraron la tasa de recuperación más alta (45.8%) en 23 días. El uso de espectroscopía DR y la determinación de la firma espectral de FO6 permitieron la evaluación del proceso de biorremediación de muestras de QS y SS de Entisols. Los resultados mostraron que la DR disminuyó con el aumento de la concentración de FO6 y las propiedades del suelo afectaron el grado de biodegradación.