El estudio tuvo como objetivo investigar los agentes causantes emergentes de la mastitis y su sensibilidad antimicrobiana, además de los indicadores hematológicos, bioquímicos, biomarcadores oxidativos, proteínas de fase aguda (APP) y cambios en las citoquinas inflamatorias en granjas lecheras en Gamasa, Gobernación de Dakahlia, Egipto. Se investigaron cien vacas lecheras Holstein Friesian con mastitis clínica y subclínica, que se asignaron a tres grupos basados en un exhaustivo examen clínico, y se encontró que eran responsables de la mastitis clínica y subclínica en las granjas lecheras, respectivamente. Se detectó resistencia múltiple a los fármacos (MDR) en el 100% y el 94.74% de los aislados, respectivamente. Se detectaron recuentos significativamente bajos de glóbulos rojos (RBC), hemoglobina (Hb) y valores de volumen celular (PCV) en vacas mastíticas en comparación con los grupos de mastitis subclínica y control; además, los recuentos de glóbulos blancos (WBC), linfocitos y neutrófilos se redujeron significativamente en vacas mastíticas en comparación con los controles. Se observaron niveles significativamente más altos de AST, LDH, proteína total y globulina en vacas mastíticas y subclínicas. Los niveles de haptoglobina, fibrinógeno, amiloide A, ceruloplasmina, TNF-alfa, IL-1beta e IL-6 aumentaron estadísticamente en vacas mastíticas en comparación con los controles. Se identificaron niveles más altos de MDA y reducción de TAC y catalasa en todos los casos de mastitis en comparación con los controles. En general, los hallazgos sugieren posibles peligros para la salud pública debido a la aparición de resistencia antimicrobiana. Mientras tanto, las APP y las citoquinas, junto con los marcadores antioxidantes, pueden ser utilizados como indicadores tempranos de mastitis.