(1) Antecedentes: El propósito de este estudio fue evaluar cómo una superficie de implante de zirconia tratada con tecnología láser afecta el grado de formación de biofilm. (2) Métodos: Se produjeron discos experimentales de titanio (Ti) que fueron arenados con grano grueso y grabados con ácido (T), y se compararon con discos de zirconia (ZrO) con una topografía de superficie mecanizada (M); una topografía de superficie hidrofílica con un láser de femtosegundos (HF); y una topografía de superficie hidrofóbica con un láser de nanosegundos (HN) (N = 12 por grupo de superficie). Se aplicó una muestra de biofilm de tres especies in vitro (Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi)) a cada tipo de disco, y se evaluó la adhesión bacteriana después de 48 y 72 h de incubación utilizando un modelo de cámara de flujo anaeróbico. La significancia estadística se determinó utilizando la prueba H de Kruskal-Wallis, con corrección de Bonferroni utilizada para la prueba post-hoc (alfa = 0.05). (3) Resultados: En comparación con el grupo T, el grupo M exhibió más del doble de recuentos bacterianos viables en las muestras de biofilm de tres especies (< 0.05). En comparación con el grupo T, el grupo HF tuvo recuentos bacterianos viables significativamente más altos en ciertas muestras de biofilm a las 48 h (Aa y Pi) y 72 h (Pi) (< 0.05). El grupo HN tuvo recuentos bacterianos viables más altos en Pi a las 48 h (5400 UFC/mL, < 0.05) que el grupo T (4500 UFC/mL), mientras que mostró recuentos bacterianos viables significativamente más bajos en Pg tanto a las 48 (3010 UFC/mL) como a las 72 h (3190 UFC/mL) (< 0.05). (4) Conclusiones: El método de tratamiento de superficie para discos de zirconia influye en gran medida en la formación de biofilm. Notablemente, el tratamiento de superficie hidrofóbica utilizando un láser de nanosegundos fue particularmente efectivo para inhibir el crecimiento de Pg.