La marchitez por Verticillium, causada por y , es una enfermedad devastadora en el lúpulo que puede causar considerables pérdidas económicas en los cultivos. El uso perenne del lúpulo combinado con la larga persistencia del patógeno en el suelo dificulta suprimir la enfermedad con medidas convencionales. Los agentes de control biológico (ACB) son la base de una estrategia de protección vegetal respetuosa con el medio ambiente que utiliza la promoción de plantas y los efectos antagonistas de los microorganismos. Evaluamos el efecto de cuatro cepas bacterianas beneficiosas seleccionadas, ZR2-12, RE*1-1-14, 3Re4-18 y DSM14405 para su uso en lúpulo. Todas las cepas demostraron ser competentes tanto en la rizosfera como en la endorriza, y sus abundancias oscilaron entre log 3.0 y log 6.2 UFC g de peso fresco de raíz en la endorriza y entre log 2.9 y log 4.7 UFC g de peso fresco de raíz en la rizosfera, siendo ZR2-12 el que mostró las densidades celulares más altas en general. La visualización microscópica de los transformantes marcados con DsRed con microscopía confocal de barrido láser mostró diferentes patrones de colonización y confirmó la competencia en la rizosfera. Se encontraron efectos de promoción del crecimiento en plántulas tratadas con bacterias para 3Re4-18 y DSM14405. La colonización competente y los efectos de promoción del crecimiento de las plantas son los requisitos más importantes para un biocontrol eficiente.