El período posparto (PP) es una etapa crucial para la reanudación del rendimiento reproductivo y la ciclicidad ovárica en búfalas lecheras. El presente estudio tuvo como objetivo, por primera vez, evaluar el efecto de la administración de benzoato de estradiol (EB) sobre la hemodinámica ovárica y uterina en búfalas lecheras en PP. Ocho búfalas domésticas pluríparas acíclicas fueron incluidas en el presente experimento y recibieron una dosis de 10 mg de benzoato de estradiol (EB) por vía intramuscular 4 semanas después del parto. Todos los animales fueron examinados dos veces antes de la administración de EB (días -3 y -1) y el día de la administración de EB (día 0), seguidos de exámenes en los días 1, 3, 5, 7 y 9 después de la administración de EB. Los patrones de flujo sanguíneo de la arteria uterina media (MUA) y la arteria ovárica (OA) se evaluaron utilizando un dispositivo de ultrasonido Doppler color. Los parámetros reproductivos fueron (1) los diámetros transversales (cm) de la OA y MUA, (2) el grosor del cuerno uterino craneal (UHT; cm), y (3) los cambios hemodinámicos dentro de la MUA en ambos lados ipsilateral y contralateral del cuerno previamente embarazado y dentro de la OA correspondiente a los tejidos ováricos. Los parámetros de flujo sanguíneo examinados fueron el índice de pulsatilidad (PI), el índice de resistencia (RI), la relación pico sistólico/end-diastólico (S/D), la velocidad máxima promedio en el tiempo (TAV; cm/s), la tasa de flujo sanguíneo uterino (BFR; bpm) y el volumen de flujo sanguíneo uterino (BFV; mL/min). Concomitantemente, se tomaron muestras de sangre de la vena coccígea, y los sueros se almacenaron a -18 grados C para su uso en ensayos de estradiol (E2-17beta) y óxido nítrico (NO). Los resultados revelaron aumentos en el diámetro transversal de la OA y MUA (cm) en los lados ipsilateral y contralateral (< 0.05) dentro de las 24 h hasta el día 9 después del tratamiento. Los valores del RI y PI del flujo sanguíneo dentro de la OA y MUA en los lados ipsilateral y contralateral del embarazo anterior fueron evidentemente más bajos (< 0.05) a las 24 h después de la administración de EB, y luego, comenzaron a elevarse gradualmente, alcanzando los valores previos al tratamiento en el día 9 después de la administración de EB. Tanto el BFR como el BFV en la OA y MUA aumentaron significativamente de 24 h a 72 h después de la administración de EB en ambos lados ipsilateral y contralateral (< 0.05); luego, sus valores comenzaron a disminuir hasta alcanzar el valor previo al tratamiento en el día 9 después de la administración de EB. Tanto las concentraciones de E2 como de NO aumentaron significativamente (< 0.05) de 24 h hasta el día 3 después de la inyección de EB y luego comenzaron a declinar después de eso, alcanzando el valor previo al tratamiento en el día 9. En conclusión, la administración de EB mejora el flujo sanguíneo ovárico y uterino concomitantemente con el aumento de los niveles de NO en búfalas lecheras en PP.