El mantenimiento de la identidad del nicho de células madre en las raíces depende del delicado equilibrio de los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS) en las puntas de las raíces; sin embargo, los intrincados mecanismos moleculares que rigen la homeostasis de ROS dentro del nicho de células madre de la raíz siguen siendo poco claros. En este estudio, revelamos el papel de la proteína 1 de la superfamilia de hidrolasas de ATP (ASP1) en la orquestación del mantenimiento del nicho de células madre de la raíz a través de su interacción con la proteína 3 que contiene el dominio de la reguladora redox cistationina beta-sintasa (CBSX3). ASP1 se expresa exclusivamente en las células del centro de quiescencia (QC) y gobierna la integridad del nicho de células madre de la raíz. La pérdida de la función de ASP1 conduce a una mayor división de células QC y a una diferenciación distal de células madre, atribuible a niveles reducidos de ROS y a una disminución de la expresión de y en las puntas de las raíces. Nuestros hallazgos iluminan el papel fundamental de ASP1 en la regulación de la señalización de ROS para mantener la homeostasis del nicho de células madre de la raíz, logrado a través de la interacción directa con CBSX3.