En el campo de la biología sintética, los avances rápidos en el ensamblaje y edición de ADN han hecho posible manipular grandes cantidades de ADN, incluso genomas enteros. Estos avances han facilitado la introducción de largas vías metabólicas, la creación de modelos de enfermedades a gran escala y el diseño y ensamblaje de megacromosomas sintéticos. En general, la introducción de grandes cantidades de ADN en células hospedantes abarca tres pasos críticos: diseño-clonación-transferencia. Esta revisión proporciona una visión general exhaustiva de los tres pasos clave involucrados en la transferencia de grandes cantidades de ADN para avanzar en el campo de la genómica sintética y la ingeniería de grandes cantidades de ADN.