Aplicación de la secuenciación por nanoporo para la genotipificación de alto rendimiento en caballos
Autores: Gurgul, Artur; Jasielczuk, Igor; Szmatoa, Tomasz; Sawicki, Sebastian; Semik-Gurgul, Ewelina; Dugosz, Bogusawa; Bugno-Poniewierska, Monika
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Aplicación de la secuenciación por nanoporo para la genotipificación de alto rendimiento en caballos
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Secuenciación de nanoporo
Polimorfismos
A nivel del genoma
Sistema MinION
SNPs
Genotipificación
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 12
Citaciones: Sin citaciones
La secuenciación por nanoporo es una técnica de secuenciación de biopolímeros de tercera generación que se basa en monitorear los cambios en una corriente eléctrica que ocurren a medida que los ácidos nucleicos pasan a través de un nanoporo de proteína. La creciente calidad de las lecturas generadas por los sistemas de secuenciación por nanoporo fomenta su aplicación en la detección de polimorfismos a nivel genómico y en la genotipificación. En este estudio, empleamos la secuenciación por nanoporo para identificar polimorfismos a nivel genómico en el genoma del caballo. Para reducir el tamaño y la complejidad de los fragmentos genómicos para la secuenciación de manera simple y rentable, amplificamos fragmentos de ADN aleatorios utilizando un DOP-PCR modificado y secuenciamos los productos resultantes utilizando el sistema MinION. Después de un filtrado inicial, esto generó 28,426 polimorfismos, que fueron validados con una tasa de error del 3%. Tras un filtrado adicional por polimorfismo y reproducibilidad, identificamos 9495 SNPs que reflejaron la estructura de la población equina. Para concluir, el uso de la secuenciación por nanoporo, junto con un paso de enriquecimiento genómico, es una herramienta prometedora que puede ser práctica en una variedad de aplicaciones, incluyendo la genotipificación, la genómica poblacional, los estudios de asociación, el mapeo de ligamiento y potencialmente la selección genómica.
Descripción
La secuenciación por nanoporo es una técnica de secuenciación de biopolímeros de tercera generación que se basa en monitorear los cambios en una corriente eléctrica que ocurren a medida que los ácidos nucleicos pasan a través de un nanoporo de proteína. La creciente calidad de las lecturas generadas por los sistemas de secuenciación por nanoporo fomenta su aplicación en la detección de polimorfismos a nivel genómico y en la genotipificación. En este estudio, empleamos la secuenciación por nanoporo para identificar polimorfismos a nivel genómico en el genoma del caballo. Para reducir el tamaño y la complejidad de los fragmentos genómicos para la secuenciación de manera simple y rentable, amplificamos fragmentos de ADN aleatorios utilizando un DOP-PCR modificado y secuenciamos los productos resultantes utilizando el sistema MinION. Después de un filtrado inicial, esto generó 28,426 polimorfismos, que fueron validados con una tasa de error del 3%. Tras un filtrado adicional por polimorfismo y reproducibilidad, identificamos 9495 SNPs que reflejaron la estructura de la población equina. Para concluir, el uso de la secuenciación por nanoporo, junto con un paso de enriquecimiento genómico, es una herramienta prometedora que puede ser práctica en una variedad de aplicaciones, incluyendo la genotipificación, la genómica poblacional, los estudios de asociación, el mapeo de ligamiento y potencialmente la selección genómica.