Este estudio investigó la biocompatibilidad y la eficacia antibacteriana de andamios de quitosano-gelatina (CH-G) cargados con formulaciones de antibióticos de liberación lenta utilizadas en procedimientos de regeneración endodóntica (REPs). Se fabricaron andamios utilizando liofilización y se cargaron con diferentes concentraciones de augmentina o pasta antibiótica triple modificada (mTAP). Se utilizó microscopía electrónica de barrido de alta resolución (SEM) para caracterizar el andamio, mientras que la liberación del fármaco se monitoreó mediante espectrofotometría UV-Vis. Se cultivaron células madre mesenquimatosas humanas inmortalizadas (hMSCs) en andamios de CH-G solos (control), con 0.1 mg/mL o 1 mg/mL de augmentina o mTAP, y 10 mg/mL de hidróxido de calcio (Ca(OH)). La viabilidad y proliferación celular se evaluaron utilizando el ensayo de Alamar Blue y SEM, respectivamente, y la tinción de vivos/muertos corroboró aún más la viabilidad celular. La actividad antibacteriana contra Enterococcus faecalis se evaluó utilizando el ensayo MTT y microscopía de escaneo láser confocal (CLSM). Los resultados mostraron que la augmentina a 0.1 mg/mL parecía promover un mejor crecimiento y adherencia celular dentro de los andamios que todas las demás formulaciones, exhibiendo una viabilidad aceptable. SEM reveló una mejor adherencia celular en los grupos de augmentina y mTAP en comparación con el grupo de Ca(OH). Los grupos de augmentina a 1 mg/mL y mTAP redujeron significativamente las bacterias viables en comparación con los controles. Los grupos de augmentina y mTAP a 1 mg/mL fueron altamente efectivos en la eliminación de biopelículas, siendo mTAP potencialmente más letal para las células dentro de las estructuras de biopelícula restantes. Este estudio sugiere que los andamios de CH-G cargados con augmentina y mTAP, particularmente a una concentración de 1 mg/mL, ofrecen ventajas prometedoras para los REPs debido a su biocompatibilidad, eficacia antibacteriana y capacidad para promover la adherencia celular. Investigaciones adicionales pueden explorar los efectos a largo plazo en entornos clínicos.