Las heridas crónicas han sido un riesgo global para la salud que exige una exploración intensiva. Se ha desarrollado un andamio de biomaterial de tres capas para heridas en la piel. La capa superior del andamio es superhidrofóbica, y la capa inferior es hidrofílica, ambas fueron electrohiladas utilizando poliestireno expandido reciclado (EPS) y línea de pesca de monofilamento (MFL), respectivamente. La capa intermedia del andamio comprendía hidrogel mediante la reticulación de quitosano (CS) con polietilenglicol. Se examinaron la morfología superficial, la química superficial, la degradación térmica y las características de humectabilidad de cada capa del andamio. Además, se evaluó la actividad antibacteriana y el estudio de citotoxicidad in vitro en el andamio de tres capas combinado contra () y (). Los datos revelaron una repelencia excepcional al agua de la capa superior superhidrofóbica tratada térmicamente electrohilada (TSL) con un ángulo de contacto con el agua (WCA) de 172.44 grados. Una TSL con un 15% en peso de micro/nano-inclusiones tuvo la mejor estabilidad térmica por encima de 400 grados Celsius. La capa inferior hidrofílica (BHL) mostró un WCA de 9.91 grados. Terapéuticamente, el efecto sinérgico del andamio de tres capas combinado inhibió significativamente el crecimiento bacteriano en un 70.5% para () y un 68.6% para (). Además, la viabilidad celular se ve mejorada cuando el PEG se incluye como parte de la composición de la capa intermedia de hidrogel de CS (ICHL).