Como herramienta de investigación importante, las líneas celulares desempeñan un papel vital en la investigación en ciencias de la vida, la investigación médica y el desarrollo de fármacos. Durante el cultivo de la línea celular del riñón cefálico (TK), encontramos un fenómeno de vacuolización celular causado por una concentración excesiva de suero. Además, la vacuolización de las células desapareció gradualmente después del paso por digestión con tripsina. Para aclarar el mecanismo de formación de esta vacuolización celular reversible, se utilizó la transcriptómica para explorar el mecanismo de vacuolización celular causado por una concentración excesiva de suero. El análisis del transcriptoma indicó que una concentración excesiva de suero podría causar la expresión regulada al alza de PORCN y otros genes para promover la proliferación celular. En comparación con las células cuya vacuolización desapareció después de la digestión con tripsina y el paso, la expresión de genes relacionados con la mitosis (BUB1, ttk, Mad2, Cdc20, CDK1, CCNB1), genes relacionados con la estabilidad nuclear LMNB1 y genes relacionados con el estrés y la reparación de tejidos HMMR en células vacuoladas causadas por una concentración excesiva de suero estaba significativamente regulada al alza. Existe un sistema regulador relacionado con la adaptación y la reparación del estrés en las células, que puede mantener la estabilidad celular hasta cierto punto. Este estudio proporciona una base teórica para el cultivo estable de líneas celulares de peces y la solución al problema de la vacuolización celular.