Análisis de Alto Rendimiento de los Niveles de Trampas Extracelulares de Neutrófilos en Subtipos de Personas con Diabetes Tipo 1
Autores: Bissenova, Samal; Buitinga, Mijke; Boesch, Markus; Korf, Hannelie; Casteels, Kristina; Teunkens, An; Mathieu, Chantal; Gysemans, Conny
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Análisis de Alto Rendimiento de los Niveles de Trampas Extracelulares de Neutrófilos en Subtipos de Personas con Diabetes Tipo 1
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Neutrófilos
Enfermedades autoinmunitarias
Formación de NET
T1D
Incucyte ZOOM
Imagenología de células vivas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 15
Citaciones: Sin citaciones
Los neutrófilos podrían desempeñar un papel importante en la patogénesis de las enfermedades autoinmunes, incluido el diabetes tipo 1 (T1D), al contribuir a la disfunción inmunitaria a través de un programa altamente inflamatorio llamado formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NET) o NETosis, que implica la extrusión de cromatina entrelazada con proteínas antimicrobianas. Sin embargo, numerosos estudios han reportado datos contradictorios sobre la formación de NET en T1D. Esto podría deberse en parte a la heterogeneidad inherente de la enfermedad y la influencia de la etapa de desarrollo de la enfermedad en el comportamiento de los neutrófilos. Además, hay una falta de un método estandarizado para medir la NETosis de manera imparcial y robusta. En este estudio, utilizamos la plataforma de imagenología de células vivas Incucyte ZOOM para estudiar los niveles de NETosis en varios subtipos de donantes adultos y pediátricos de T1D en comparación con controles sanos (HC) en condiciones basales y en respuesta a acetato de fobol-miristato (PMA) e ionomicina. En primer lugar, determinamos que la técnica permite una cuantificación automatizada e independiente del operador de la formación de NET a través de múltiples puntos temporales, lo que mostró que PMA e ionomicina inducen NETosis con características cinéticas distintas, confirmadas por microscopía de alta resolución. Los niveles de NETosis también mostraron una clara curva de respuesta a dosis en relación con las concentraciones crecientes de ambos estímulos. En general, utilizando Incucyte ZOOM, no se observó formación aberrante de NET a lo largo del tiempo en los diferentes subtipos de poblaciones de T1D, independientemente de la edad, en comparación con HC. Estos datos fueron corroborados por los niveles de marcadores periféricos de NET en todos los participantes del estudio. El estudio actual mostró que la imagenología de células vivas permite un análisis y cuantificación robustos e imparciales de la formación de NET en tiempo real. Las medidas de neutrófilos periféricos deben complementarse con la cuantificación dinámica de neutrófilos que están formando NET para hacer conclusiones sólidas sobre la formación de NET en la salud y la enfermedad.
Descripción
Los neutrófilos podrían desempeñar un papel importante en la patogénesis de las enfermedades autoinmunes, incluido el diabetes tipo 1 (T1D), al contribuir a la disfunción inmunitaria a través de un programa altamente inflamatorio llamado formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NET) o NETosis, que implica la extrusión de cromatina entrelazada con proteínas antimicrobianas. Sin embargo, numerosos estudios han reportado datos contradictorios sobre la formación de NET en T1D. Esto podría deberse en parte a la heterogeneidad inherente de la enfermedad y la influencia de la etapa de desarrollo de la enfermedad en el comportamiento de los neutrófilos. Además, hay una falta de un método estandarizado para medir la NETosis de manera imparcial y robusta. En este estudio, utilizamos la plataforma de imagenología de células vivas Incucyte ZOOM para estudiar los niveles de NETosis en varios subtipos de donantes adultos y pediátricos de T1D en comparación con controles sanos (HC) en condiciones basales y en respuesta a acetato de fobol-miristato (PMA) e ionomicina. En primer lugar, determinamos que la técnica permite una cuantificación automatizada e independiente del operador de la formación de NET a través de múltiples puntos temporales, lo que mostró que PMA e ionomicina inducen NETosis con características cinéticas distintas, confirmadas por microscopía de alta resolución. Los niveles de NETosis también mostraron una clara curva de respuesta a dosis en relación con las concentraciones crecientes de ambos estímulos. En general, utilizando Incucyte ZOOM, no se observó formación aberrante de NET a lo largo del tiempo en los diferentes subtipos de poblaciones de T1D, independientemente de la edad, en comparación con HC. Estos datos fueron corroborados por los niveles de marcadores periféricos de NET en todos los participantes del estudio. El estudio actual mostró que la imagenología de células vivas permite un análisis y cuantificación robustos e imparciales de la formación de NET en tiempo real. Las medidas de neutrófilos periféricos deben complementarse con la cuantificación dinámica de neutrófilos que están formando NET para hacer conclusiones sólidas sobre la formación de NET en la salud y la enfermedad.