Eurycomanona y eurycomalactona son quassinoides conocidos presentes en las raíces y tallos de . Se ha informado que estos compuestos tienen efectos citotóxicos; sin embargo, su mecanismo de acción en algunas líneas celulares de cáncer aún no ha sido elucidado. Este estudio tuvo como objetivo investigar los efectos anticancerígenos y los mecanismos de acción de eurycomanona y eurycomalactona en líneas celulares de cáncer cervical (HeLa), colorrectal (HT29) y ovárico (A2780) a través del ensayo de Sulforhodamina B. Su mecanismo de muerte celular se evaluó en base al ensayo de Hoechst 33342 y al acoplamiento molecular in silico hacia DHFR y TNF-alfa como posibles objetivos proteicos. Eurycomanona y eurycomalactona exhibieron efectos anticancerígenos in vitro manifestando valores de IC de 4.58 +/- 0.090 uM y 1.60 +/- 0.12 uM (HeLa), 1.22 +/- 0.11 uM y 2.21 +/- 0.049 uM (HT-29), y 1.37 +/- 0.13 uM y 2.46 +/- 0.081 uM (A2780), respectivamente. Indujeron muerte celular cancerosa apoptótica de manera dependiente de la dosis y del tiempo. Tanto eurycomanona como eurycomalactona también se predijo que tienen un buen potencial inhibitorio, como lo demuestra el acoplamiento a TNF-alfa con una afinidad de unión de -8.83 y -7.51 kcal/mol, respectivamente, así como a DHFR con resultados de afinidad de unión de -8.05 y -8.87 kcal/mol, respectivamente. Estos resultados apoyan la evidencia de eurycomanona y eurycomalactona como agentes anticancerígenos a través de un mecanismo de muerte celular apoptótica que podría estar asociado con la inhibición de TNF-alfa y DHFR como posibles objetivos proteicos.