Se investigó el perfil metabolómico de cuatro cultivares comerciales de semillas de frijol italianas, es decir, Cannellino (PCANN), Controne (PCON), Vellutina (PVEL) y Occhio Nero (PON), mediante espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear (RMN) y análisis de datos multivariantes. El análisis de los extractos hidroalcohólicos y orgánicos reveló más de 32 metabolitos de varias clases, es decir, carbohidratos, aminoácidos, ácidos orgánicos, nucleósidos, alcaloides y ácidos grasos. Las variedades PVEL, PCON y PCANN mostraron perfiles químicos similares, aunque con resultados cuantitativos algo diferentes. La composición de metabolitos de PON fue ligeramente diferente a las demás; carecía de GABA y ácido pipecólico, presentaba un porcentaje más alto de ácido málico que las otras muestras y mostraba variaciones cuantitativas de varios metabolitos. Los extractos lipofílicos de los cuatro cultivares demostraron la presencia de ácidos grasos insaturados omega-3 y omega-6. Después de la determinación del contenido total de fenoles, flavonoides y taninos condensados, se evaluó la actividad antioxidante in vitro utilizando la actividad de captura de DPPH, el ensayo de captura de ABTS y el poder antioxidante reductor férrico (FRAP). En comparación con las semillas no oscuras (PCON, PCANN), las semillas marrones (PVEL, PON) presentaron una mayor capacidad antioxidante. Por último, solo el extracto de PON mostró actividad antifúngica in vitro contra el crecimiento de esclerocios, inhibiendo el crecimiento halo en un 75%.