En las tierras áridas y semiáridas de Túnez, el estrés por sequía sigue siendo el factor más crítico que limita la producción agrícola debido a la baja y irregular precipitación. La situación es aún más difícil debido a la escasez de agua subterránea para riego y al cambio climático que ha intensificado y ampliado la aridez. Uno de los enfoques más eficientes y sostenibles para mitigar el estrés por sequía es explorar la variabilidad genotípica para seleccionar genotipos tolerantes e identificar rasgos de tolerancia útiles. Con este fin, se cultivaron seis genotipos de trigo tunecino (Desf.) en el campo, bajo un invernadero y luz natural, para estudiar su tolerancia diferencial al estrés por sequía. Se analizaron muchos rasgos morfo-fisiológicos y bioquímicos, y se establecieron interrelaciones. Dependiendo de los genotipos, el estrés por sequía disminuyó significativamente el crecimiento de las plantas, la biosíntesis de clorofila y la fotosíntesis; estimuló la acumulación de osmólitos y alteró las relaciones hídricas. Los genotipos más tolerantes (salim y karim) acumularon más potasio (K) y prolina en sus brotes, lo que les permitió mantener una mejor hidratación de los tejidos y un funcionamiento fisiológico adecuado. El ajuste osmótico (AO), en el que el potasio y la prolina juegan un papel clave, determina la tolerancia del trigo al estrés por sequía. El índice de sequía calculado (IS), el índice de susceptibilidad a la sequía (ISD), el índice de tolerancia a la sequía (ITD), la eficiencia en el uso de K (EUK) y la eficiencia en el uso del agua (EUA) discriminaron los genotipos estudiados y confirmaron la tolerancia relativa de salim y karim.