Se aplicaron nanopartículas de quitina-lignina (CN-NL), de forma independiente y encapsulando ácido glicirricínico (GA), en nuevos sustratos para textiles para obtener propiedades antibacterianas y antioxidantes. Su aplicación homogénea es un parámetro importante que puede influir fuertemente en el rendimiento final de los textiles investigados para su uso cosmético y médico. En este trabajo, se investigaron técnicas de imagen hiperespectral combinadas con herramientas quimiométricas para estudiar la distribución y cuantificación de CN-NL/GA en sustratos de quitosano y CN-NL en sustratos de pullulano. Para ello, se analizaron muestras de quitosano y pullulano impregnadas con CN-NL/GA y CN-NL a través de cámaras hiperespectrales de infrarrojo de onda corta (SWIR) y visible-cercano al infrarrojo (VisNIR). Se aplicaron dos herramientas quimiométricas diferentes para el análisis cualitativo y cuantitativo, análisis de componentes principales (PCA) y modelos de regresión de mínimos cuadrados parciales (PLSR). Se obtuvieron resultados prometedores en el rango VisNIR, lo que nos permitió visualizar el compuesto CN-NL/GA en sustratos de quitosano y CN-NL en sustratos de pullulano. Además, los resultados del modelo PLSR tuvieron coeficientes de determinación (para calibración y validación cruzada) de 0.983 y 0.857, respectivamente. Los valores mínimos de error cuadrático medio para calibración (RMSEC) y validación cruzada (RMSECV) de CN-NL/GA fueron 0.333 y 0.993 g, respectivamente. Los resultados demuestran que la imagen hiperespectral combinada con quimiometría ofrece una herramienta poderosa para estudiar la distribución en sustratos de quitosano y pullulano y cuantificar el contenido de compuestos CN-NL/GA en sustratos de quitosano.